細胞凋亡檢測的主要特征為核染色質致密深染,形成致密質塊,有時可碎裂。在HE染色的組織切片中細胞體積縮小,胞質致密、嗜酸性染色增強,并可形成凋亡小體。在組織中凋亡細胞常以分散單個形式存在,凋亡細胞與周圍細胞分離,不引起炎癥反應。
本方法簡便易行,但在細胞密集的組織中對于改變不典型的細胞判斷較困難,常缺乏較為特征的指標,具有較強的主觀性,重復性差。本方法可用于調亡現(xiàn)象的初步觀察,作為分析指標之一。
檢測方法:細胞涂片或組織石蠟切片作HE染色或Giemsa染色,在高倍物鏡下觀察凋亡細胞的形態(tài)改變,結合顯微測量工具可作凋亡細胞計數(shù)。
二、視頻時差顯微技術
本方法用于細胞培養(yǎng),通過相差顯微鏡可動態(tài)觀察細胞凋亡的變化過程,尤其是觀察細胞表和外形的變化。凋胞與基質分離,胞體變圓、收縮、出泡,有的細胞拉長,出現(xiàn)釘狀突起,特續(xù)數(shù)小時后細胞膜破裂,細胞溶解,通過連續(xù)觀察,本方法可養(yǎng)壑培養(yǎng)中的凋亡細胞,但不能用于病理組織。
細胞凋亡檢測檢測方法:收集2×105細胞/ml培胞,置于多孔培養(yǎng)板,加入凋亡誘導劑,在帶有自動攝像裝置的相差顯微鏡下觀察凋亡細胞的動態(tài)改變,每隔分鐘30秒作序列攝影,連續(xù)24小時。如同進進行熒光染色,可參熒光晃微鏡下觀察和攝影。
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細胞凋亡檢測
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