細胞凋亡檢測實驗準備室的設備:
單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品規(guī)(放置消毒過的物品)、包裝臺。
配液室的設備:
扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)。
培養(yǎng)室的設備:
液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)。必須放在無菌間的設備:離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。
無菌操作
無菌室的滅菌:
1.定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%過氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%過氧乙酸,再用紫外燈照射。
3.實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各20~30分鐘。
4.實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。
實驗人員的無菌準備:
1.肥皂洗手。
2.穿好*、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋 。
3.用75%酒精棉球擦凈雙手。
細胞凋亡檢測無菌操作的演示:
1.凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、*的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面 。
2.靠近酒精燈火焰操作。
3.器皿使用前必須過火滅菌。
4.繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時仍要過火。
5.各種操作要靠近酒精燈,動作要輕、準確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。
6.吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。
人肺成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
人支氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
人小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
人氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
人支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人胰島β細胞*培養(yǎng)基 100mL
人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
人前列腺成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
細胞凋亡檢測
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