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細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件及步驟

時(shí)間:2018/5/15閱讀:179
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細(xì)胞培養(yǎng)是一種無(wú)菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無(wú)煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)工作包括:工作液配制、無(wú)菌操作(采樣)、溫育、無(wú)菌處理,細(xì)胞和用品貯存等。

    細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)實(shí)施原則一般是無(wú)菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。
一、常用設(shè)施及設(shè)備

(1)超凈工作臺(tái):也稱凈化工作臺(tái),分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。

(2)無(wú)菌操作間:一般由更衣間、緩部間和操作間三部分組成.操作間放置凈化工作臺(tái)及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機(jī)、倒置顯微鏡等.緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無(wú)菌物品等。

(3)操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機(jī)、水浴鍋、定時(shí)鐘、普通天平及日常分析處理物品。

(4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。

(5)分析間:顯微鏡、計(jì)算機(jī)及打印機(jī)等。

二、培養(yǎng)器皿

細(xì)胞培養(yǎng)以玻璃器皿為主,常準(zhǔn)備需是使用的三倍。器皿應(yīng)選擇透明度好、無(wú)毒、中性硬度玻璃制品。

常用的玻璃器皿有下面幾種:

(1)液體儲(chǔ)存瓶:用于儲(chǔ)存各種配制好的培養(yǎng)液、血清等液體,常以500ml、250ml、100ml生理鹽水瓶或血漿瓶代替。

(2)培養(yǎng)瓶:根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞種類要求不同培養(yǎng)瓶的形態(tài)各異,用于細(xì)胞傳代培養(yǎng)的細(xì)胞要求瓶壁厚簿均勻,便于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和觀察,瓶口要大小一致,口徑一般不小于1cm,允許吸管伸入瓶?jī)?nèi)任何部位,規(guī)格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml等幾種.用于外周血培養(yǎng)的常用10ml普通圓瓶.兩種培養(yǎng)瓶均要求選用玻璃制成。

(3)培養(yǎng)皿:用于開(kāi)放式培養(yǎng)及其它用途.分直徑30mm、60mm、120mm等幾種。

(4)吸管:常用的有長(zhǎng)吸管和短吸管兩類,長(zhǎng)吸管也稱刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用于移動(dòng)液體.常用1ml和10ml兩種.短吸管也叫滴管,分彎頭和直頭兩種。

(5)離心管:離心管是細(xì)胞培養(yǎng)中使用廣泛的器皿,根據(jù)用途不同形態(tài)各樣,常用于細(xì)胞培養(yǎng)的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類.前者分別為50ml、30ml、15ml后者則多為10ml和5ml。

(6)其它:如三角燒瓶、燒杯、量筒、漏斗、注射器等。

Dydrogesterone 200mg 去氫孕酮標(biāo)準(zhǔn)品 152-62-5

Verapamil Hydrochloride 200mg *標(biāo)準(zhǔn)品 152-11-4 

200mg 普伐他汀1,1,3,3-四甲基氨基丁烷標(biāo)準(zhǔn)品 151006-14-3 

Procyclidine Hydrochloride 200mg 鹽酸丙環(huán)定標(biāo)準(zhǔn)品 1508-76-5 

Tropicamide 200mg *標(biāo)準(zhǔn)品 1508-75-4 

Oxybutynin Chloride 200mg 氯化奧昔布寧標(biāo)準(zhǔn)品 1508-65-2 

Balsalazide Disodium 200mg *標(biāo)準(zhǔn)品 150399-21-6

Aminobenzoic Acid 200mg 氨苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品 150-13-0

Saquinavir Mesylate 200mg 甲磺酸沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品 149845-06-7 

Erythritol 200mg 赤蘚糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 149-32-6

Docetaxel 200mg 三水多烯*標(biāo)準(zhǔn)品 148408-66-6
細(xì)胞培養(yǎng)

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