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細胞培養(yǎng)生長過程:潛伏期→指數(shù)增生期→停滯期
潛伏期 (latent phase)
細胞接種后, 先經過一個在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期. 此時, 細胞質回縮, 胞體呈圓球形. 然后細胞貼附于載體表面, 稱貼壁, 懸浮期結束. 細胞貼壁速度與細胞種類, 培養(yǎng)基 成分, 載體的理化性質等密切相關。一般情況下,原代培養(yǎng)細胞貼壁速度慢, 可達 10-24 小時或更多, 而傳代細胞系貼壁速度快, 通常 10-30 分鐘即可貼壁。細胞貼壁后還需經過一個潛伏階段,才進入生長和增殖期. 原代培養(yǎng)細胞潛伏期長,約 24-96 小時或更長, 連續(xù) 細胞系和腫瘤細胞潛伏期短,僅需 6-24 小時。
(2) 指數(shù)增生期 (logarithmic growth phase)
這是細胞增殖旺盛的階段,分裂相細胞增多。指數(shù)增生期細胞分裂相數(shù)量可作為 判定細胞生長是否旺盛的一個重要標志。通常以細胞分裂相指數(shù)(Mitotic index, MI)表 示,即細胞群中每 1000 個細胞中的分裂相數(shù)。一般細胞的分裂指數(shù)介于 0.1%-0.5%,原 代細胞分裂指數(shù)較低,而連續(xù)細胞和腫瘤細胞分裂相指數(shù)可高達 3%-5%。指數(shù)增生期 的細胞活力時期,是進行各種實驗時期,也是凍存細胞的時機。在接種細 胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù) 3-5 天后,隨著細胞數(shù)量不斷增多、生長空間減少, 后細胞相互接觸匯合成片。正常細胞相互接觸后能抑制細胞運動,這種現(xiàn)象稱接觸抑 制現(xiàn)象 (contact inhibition)。而惡性腫瘤細胞無接觸抑制現(xiàn)象,能繼續(xù)移動和增殖,導致 細胞向三維空間擴展,使細胞發(fā)生堆積(piled up)。細胞接觸匯合成片后,雖然發(fā)生接 觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,細胞仍能進行增殖分裂,因此細胞數(shù)仍然在增多。但是,當 細胞密度進一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產物增多時,細胞因營養(yǎng)枯竭和代 謝產物的影響,導致細胞分裂停止,這種現(xiàn)象稱密度抑制現(xiàn)象(Density Inhibition)。
(3)細胞培養(yǎng)停滯期 (Stagnate phase)
細胞數(shù)量達到飽和密度后,如不及時進行傳代,細胞就會停止增殖,進入停止期。此時 細胞數(shù)持平,故也稱平臺期(Plateau phase)。停滯期細胞雖不增殖,但仍有代謝活動。如 不進行分離傳代,細胞會因培養(yǎng)液中營養(yǎng)耗盡、代謝產物積聚、pH 下降等因素中毒,出 現(xiàn)形態(tài)改變,貼壁細胞會脫落,嚴重的會發(fā)生死亡,因此,應及時傳代。
27200-12-0 Dihydromyricetin 20mg/支 二氫楊梅素
1135-24-6 Ferulic acid 20mg/支 阿魏酸
501-36-0 Resveratrol 20mg/支 白藜蘆醇
27208-80-6 Polydatin 20mg/支 虎杖苷
薄荷醇
552-41-0 Paeonol 20mg/支 丹皮酚
96574-01-5 Salvianolic acid A 20mg/支 丹酚酸A
115939-25-8 Salvianolic acid B 20mg/支 丹酚酸B
568-72-9 Tanshinone IIA 20mg/支 丹參酮IIA
丹參酮IIA-磺酸鈉
568-73-0 Tanshinone I 20mg/支 丹參酮I
87205-99-0 Dihydrotanshinone I 20mg/支 二氫丹參酮I
細胞培養(yǎng)
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