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中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。籆HO-HCV-NS2實驗方法

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更新時間:2017-07-07 13:44:40瀏覽次數(shù):133次

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適用領(lǐng)域 科研
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細胞名稱   中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-HCV-NS2實驗方法
形態(tài)特性 上皮細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 CHO-HCV-NS2細胞整合有丙型肝炎病毒的NS2基因,能穩(wěn)定表達NS2蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。

培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C20

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基

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中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2實驗方法

貼壁生長

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中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-HCV-NS2實驗方法細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?/span>CHO-HCV-NS2實驗方法操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
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1314-dihydro Prostaglandin F1α 5 mg     9。alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-prostan-1-oic acid PGFα|13,14-dihydro PGF1α; 13,14-dihydro Prostaglandin F1α

MMB018 5 mg     methyl 1-pentyl-1H-indole-3-carbonyl-L-valinate

L-*(25GM     L-Threonine 72-19-5; MW 119.12; USP

Furin Inhibitor I 1 mg     N2-1-oxodecyl-L-arginyl-L-valyl-N-[1S-4-[aminoiminomethylamino]-1-2-chloroacetylbutyl]-L-lysinamide; Decanoyl-Arg-Val-Lys-Arg-CMK; Furin Inhibitor I

Prostaglandin A1 methyl ester 5 mg     15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10,13E-dien-1-oic acid methyl ester; PGA1 methyl ester; Prostaglandin A1 methyl ester

3,5,73’,4-Pentahydroxyflavone     Quercetin Dihydrate
G6PDH Enzyme Mixture 1 ea     G6PDH Enzyme Mixture

*標記組蛋白H3多肽(69-89     Biotinylated Histone H3 Peptide residues 69-89 200 ul

Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate 1 mg     2S-ammonio-3R-hydroxy-5-((2-oxo-2H-chromen-7-yloxypentyl hydrogen phosphate S1P Lyase Fluorogenic Substrate; Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate

PLX4720 25 mg     Raf Kinase Inhibitor V; N-[3-[5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-ylcarbonyl]-2,4-difluorophenyl]-1-propanesulfonamide

5-N-ethyl-N-isopropyl-Amiloride 10 mg     3-amino-N-aminoiminomethyl-6-chloro-5-[ethyl1-methylethylamino]-2-pyrezinecarboxamide; EPIA|L-593,754|MH 12-43; 5-N-ethyl-N-isopropyl-Amiloride

19-R)-hydroxy Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard (1 mg)     19(R)-OH PGE2|19(R)-hydroxy PGE2, 19-R)-hydroxy Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard, 9-oxo-11α,15S,19R-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2實驗方法Ellmans Reagent 250 dtn     Ellmans Reagent

1,2-O-Dioctadecyl-rac-glycerol 1 g     2,3-bisoctadecyloxy-1-propanol

yenine 5一元酸 [相當于Cy5]     yenine 5 monoacid [equivalent to Cy5 acid]

Donepezil 25 mg     2,3-dixy7no-5,6-dimetxoxy-2[[1-pxenylmetxyl-4-piperidinyl]metxyl]-1H-inden-1-one Aricept Donepezil

5S),6R-Lipoxin A4 250 ug     5S,6R,15S-trixy7noxy-7E,9E11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5S),6R),15S-TriHETE|5S),6R-LXA4; 5S),6R-Lipoxin A4

2R-2-[[9-Isopropyl-6-N-metxylanilinopurin-2-yl]amino]butan-1-ol; Amyloidβ Forty-Two Inducer 5     Aftin-5

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