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小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗CD3);OKT 3實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-06-30 12:57:28瀏覽次數(shù):203次

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小鼠雜交瘤細(xì)胞(CD3)OKT 3實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

生長(zhǎng)特性

價(jià)格

小鼠雜交瘤細(xì)胞(CD3);OKT 3實(shí)驗(yàn)方法

半貼壁生長(zhǎng)

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細(xì)胞名稱(chēng)   小鼠雜交瘤細(xì)胞(CD3);OKT 3實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)

特征特性 可產(chǎn)生抗CD3的單克隆抗體

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1:2傳代。

傳代情況

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 陰性

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 B類(lèi)

小鼠雜交瘤細(xì)胞(CD3);OKT 3實(shí)驗(yàn)方法細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
DMAPP ammonium salt 500 ug     3-methyl-2-butenyl-1-diphosphoric acid, triammonium salt; Dimethylallyl Pyrophosphate ammonium salt); DMAPP ammonium salt

AT-7519 hydrochloride 25 mg     4-[2,6-dichlorobenzoylamino]-N-4-piperidinyl-1H-Pyrazole-3-carboxamide hydrochloride

JWH 200 solution 10 mg     [1-[2-4-morpholinylethyl]-1H-indol-3-yl]-1-naphthalenyl-methanone; JWH 200 solution

PHA 665752 25 mg     3Z-5-[[2,6-dichlorophenylmethyl]sulfonyl]-3-[[3,5-dimethyl-4-[[2R-2-1-pyrrolidinylmethyl-1-pyrrolidinyl]carbonyl]-1H-pyrrol-2-yl]methylene]-1,3-dihydro-2H-indol-2-one

Spectinomycin hydrochloride hydrate 1 g     5aR,9aR,10aS-decahydro-4aR,7S9S-trihydroxy-2R-methyl-6S,8R-bismethylamino-4H-pyrano[3-b][1,4]benzo7ioxin-4-one dihydrochloride pentahydrate; Spectinomycin hydrochloride hydrate

pGB BID siRNA Vector Mix     pGB BID siRNA Vector Mix
15S-HETrE 500 ug     15S-xy7noxy-8Z,11Z,13E-eicosatrienoic acid 15S-HETrE

β-Nicotinamide Mononucleotide 25 mg     β-NMN; 3-aminocarbonyl-1-5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl-pyridinium, inner salt

iFluor 647-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 647-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Pentadecanoyl Ethanolamide 5 mg     N-2-xy7noxyetxyl-pentadec*; Pentadecanoyl Ethanolamide

5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid 10 mg     5Z8Z,11Z-eicosatrienoic acid Mead Acid; 5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid

4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluorometxylpxenyl]-5-thiazolidinylidene]metxyl]benzoic acid; CFTRinh-172     CFTR Inhibitor-172
GnT-V (nt38-67)Val-Leu-Pro-Asp-Val-Phe-Ile-Arg-Cys-Val

α-CGRP (33-37) (canine, mouse, porcine, rat)Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2

[Met5, Lys6] a-Neo-Endorphin (1-6)Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Lys

Biotin-KemptideBiotin-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly

p34cdc2-derived peptideLys-Val-Glu-Lys-Ile-Gly-Glu-Gly-Thr-Tyr-Gly-Val-Val-NH2
111974-72-2 富馬酸*標(biāo)準(zhǔn)品(N/A) 50mg

*Paclitaxel33069-6-4HPLC98%,20mg/

PiperolactaM C PIPEROLACTAM C 116064-76-7

*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品102767-31-7 20mg

人參炔醇 21852-80-2 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
紫蓳靈 Corynoline (98%,HPLC) 18797-79-0 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

常春藤Hedera helix 常春藤苷D 760961-03-3 C53H86O22 98% 藜蘆醇18089-101

Isoalantolactone異土木香內(nèi)酯470-17-7異阿蘭內(nèi)酯20mg/

*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品130855-30-0 15mg

金銀花 lonicera japonia thunb. Cynarin 1,3-O-二酰奎寧酸 1182-34-9 C25H24O12 98%
小鼠雜交瘤細(xì)胞(CD3);OKT 3實(shí)驗(yàn)方法*標(biāo)準(zhǔn)品 100mg

沒(méi)食子兒茶速EpigallocatechinHPLC98%,5mg/

Hispidone 鬃毛同 73891-72-2

鹽酸標(biāo)準(zhǔn)品956-90-1 25mg鹽酸標(biāo)準(zhǔn)品

;2,6-Dixy7noxypur 69-89-6 20mg 訂購(gòu)|咨詢

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