公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571操作步驟的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571操作步驟
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:3傳代；2~3天1次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571操作步驟的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
CM-H039人小腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

TLK2 Others Human 人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人腦膜細(xì)胞HMC

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A 人肺癌細(xì)胞，NCI-H1755[H1755]細(xì)胞 MGC80-3(胃癌細(xì)胞)

人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3

ACP5 Others Mouse 小鼠 ACP5 / TRAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
HA Others H6N4 甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CM-H028人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

試劑耗材

KB人口腔表皮樣癌細(xì)胞 KB human oral epidermoid carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSRPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL4 Protein Mouse 重組小鼠 IL4 / Interleukin-4 蛋白 (Q136D, Y139D, His 標(biāo)簽)

人表皮淋巴內(nèi)管皮細(xì)胞(HDLEC)(5×105) 人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human
CM-H028人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HA Others H6N4 甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

試劑耗材

KB人口腔表皮樣癌細(xì)胞 KB human oral epidermoid carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSRPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL4 Protein Mouse 重組小鼠 IL4 / Interleukin-4 蛋白 (Q136D, Y139D, His 標(biāo)簽)

人表皮淋巴內(nèi)管皮細(xì)胞(HDLEC)(5×105) 人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human
T1N3肉湯  進(jìn)口分裝  芴(標(biāo)準(zhǔn)品)  Fluorene  號(hào)：  86-73-7  質(zhì)量規(guī)格：  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(HPLC)

Halophilicexperimentalmedium  進(jìn)口分裝  無水(無水級(jí), 99.9%,H2O≤10ppm)  anhydrous   號(hào)：  27522  質(zhì)量規(guī)格：  無水級(jí), 99.9%,H2O≤10ppm

肝肉瓊脂培養(yǎng)基  進(jìn)口分裝  1,3-丁二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)   (±)-1,3-Butanediol  號(hào)：  107-88-0
小鼠α羥基丁酸脫氫酶elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  BML-275 HCl,物質(zhì)C鹽酸鹽  Dorsomorphin 2HCl;BML275.HCL;Compound C  號(hào)：  1219168-18-9  質(zhì)量規(guī)格：  >98%,AMPK選擇性抑制劑

小鼠α葡萄糖苷酶elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *（標(biāo)準(zhǔn)品）  Methimazole  號(hào)：  60-56-0  質(zhì)量規(guī)格：  含量測(cè)定

小鼠α干擾素elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  枸櫞酸米芬（標(biāo)準(zhǔn)品）  Clomiphene citrate  號(hào)：  50-41-9  質(zhì)量規(guī)格：  含量測(cè)定

小鼠α甘露糖苷酶elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  甲磺酸雙氫毒堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Dihydroergotoxine mesylate  號(hào)：  8067-24-1  質(zhì)量規(guī)格：  含量測(cè)定
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571操作步驟前列腺素F1α  進(jìn)口分裝  1-Decarboxy-3-oxo-ceanothic acid  1-Decarboxy-3-oxo-ceanothic acid  214150-74-0  C29H44O3  ≥98%

人磷酸化酪酸激酶P-JAK2  進(jìn)口分裝  3-Epidehydropachymic acid  3-Epidehydropachymic acid  168293-15-0  C33H50O5  ≥98%

生存素  進(jìn)口分裝  5,19-Epoxy-19R,25-dimethoxycucurbita-6,23-dien-3-ol  5,19-Epoxy-19R,25-dimethoxycucurbita-6,23-dien-3-ol  85372-72-1  C32H52O4  ≥98%

可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1  進(jìn)口分裝  20(R)-Ginsenoside Rh2  20(R)-Ginsenoside Rh2  112246-15-8  C36H62O8  ≥98%