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所 在 地上海市
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更新時間:2017-06-28 09:29:20瀏覽次數(shù):165次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575操作步驟
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,12;D12S391:18,21;D13S317:11,14;D16S539:9,9;D18S51:12,17;D19S433:13,14.2;D21S11:29,30;D2S1338:16,24;D3S1358:15,17;D5S818:12,12;D6S1043:11,14;D7S820:9,9;D8S1179:11,14;FGA:23,23;Penta E:10,12;TH01:8,8;TPOX:8,10;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
產(chǎn)品名稱 | |
生長特性 | 貼壁生長 |
發(fā)貨地 | 上海 |
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575操作步驟的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575操作步驟復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
冠狀動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M-2B4
FO細胞,骨髓瘤細胞 人胚肝二倍體細胞,CCC-HEL-1細胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
LAMP3 Others Human 人 CD208 / LA
SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 人肺癌細胞,NCI-H838[H838]細胞 BGC-823(胃腺癌細胞(低分化))
人橫紋肌肉瘤細胞;A-204
IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 人肺癌細胞,NCI-H838[H838]細胞 BGC-823(胃腺癌細胞(低分化))
人橫紋肌肉瘤細胞;A-204
IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液 (陽性對照)
BCYEAgarBase 進口分裝 鉛(>98%,BR) Lead (II) thiocyanate 號: 592-87-0 質(zhì)量規(guī)格: >98%,BR
LBAgar 進口分裝 重水,氧化氘(0.55ml*10) Deuterium Oxide 號: 7789-20-0 質(zhì)量規(guī)格: D,99.9%
XyloseLysineDesoxycholateMedium 進口分裝 氘代(10 g ) Pyridine-D5 號: 7291-22-7
小鼠血管緊張素elisa試劑盒 進口分裝 鷹嘴豆芽素A(標準品) Biochanin A 號: 491-80-5 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥98%,標準品
小鼠血管活性腸肽elisa試劑盒 進口分裝 鷹嘴豆芽素A Biochanin A 號: 491-80-5 質(zhì)量規(guī)格: >98%,BR
小鼠性激素結(jié)合球蛋白elisa試劑盒 進口分裝 柚皮苷,川陳皮素 Naringin 號: 10236-47-2 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥98%,標準品
小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒 進口分裝 羽扇豆醇(標準品) Lupeol 號: 545-47-1 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥98%,標準品
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575操作步驟可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒 進口分裝 英文名稱: 1,4- butyl ester 號: 分子式: 86.09 分子量: C4H6O2
β-木糖苷酶測試盒 進口分裝 二十五酸 英文名稱: Twenty-five acid 號: 分子式: 382.67 分子量: CH3(CH2)23COOH
土壤β-葡萄糖苷酶(β-GC)測試盒 進口分裝 甲基叔丁基醚 英文名稱: Methyl tert butyl 號: 1634-04-4 分子式: 88.15 分子量: C5H12O
增殖誘導(dǎo)配體 進口分裝 化聚丙烯 英文名稱: Chlorinated polypropylene 號: 68442-33-1 分子式: 分子量:
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