Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-590实验方法 返回列表页

细胞名称   Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-590实验方法
形态特性 上皮样

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B细胞稳定表达Cas9-Flag-Puromycin，经2ug/ml嘌呤霉素筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；2ug/ml Puromycin

传代方法 消化3-5分钟；1:2传代；3天内可长满。

传代情况 C3

冻存条件 *培养基+8%DMSO

支原体检测 阴性

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；

同工酶

染色体

使用权限 A类

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Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-590实验方法细胞培养
1、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生*的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-590实验方法操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
造骨细胞生长添加物ObGS

TNFRSF13B Others Human 人 TNFRSF13B / TACI / CD267 人细胞裂解液 (阳性对照)

CP-88 草鱼胚胎细胞

CL-00063T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)5×106cells/瓶×2

HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9803 人颅盖造骨细胞*培养基 100mL
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基质永生化细胞)5×106cells/瓶×2

大鼠虹膜色素上皮细胞*培养基 100mL

U-373MG人脑神经胶质瘤细胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS

IL1B Protein Rabbit 重组兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)
CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基质永生化细胞)5×106cells/瓶×2

CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠虹膜色素上皮细胞*培养基 100mL

U-373MG人脑神经胶质瘤细胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS

IL1B Protein Rabbit 重组兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)
抗生素检定培养基1号(高PH)250用于*，*，*，*等效价测定incubationmedia抗生素检定培养基1号(高PH)250用于*，*，*，*等效价测定  进口分装  雌三醇(标准品)  Estriol  号：  50-27-1  质量规格：  HPLC>97%,标准品

克氏双糖铁琼脂250用于细菌复合生化试验(葡萄糖，乳糖)incubationmedia克氏双糖铁琼脂250用于细菌复合生化试验(葡萄糖，乳糖)  进口分装  氢噻嗪（标准品）  Hydr
人血管活性肠肽elisa试剂盒  进口分装  次(标准品)  Hyp  号：  6900-87-4  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人旋毛虫抗体elisa试剂盒  进口分装  次野鸢尾黄素（标准品）  Irisflorentin  号：  41743-73-1  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人溴脱氧核苷*elisa试剂盒  进口分装  刺芒柄花苷（标准品）  Ononin  号：  486-62-4  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人雄烯二elisa试剂盒  进口分装  刺五加苷E（标准品）  Eleutheroside E  号：  39432-56-9  质量规格：  HPLC≥98%，标准品
Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-590实验方法德国进口金属离子、化学成分定性测试纸  进口分装  41753-55-3  Ophiopogonin D  C44H70O16  855.02  Steroids  >=98%  20mg

DPD余测定试剂盒  进口分装      C41H64O14  780.94  Steroids  >=98%  20mg

硫化物测定试剂盒  进口分装  473-98-3  Betulin  C30H50O2  442.7  Triterpenoids  >=98%  20mg

酶（CAT）试剂盒  进口分装  1011850  Theaflavin  C29H24O12  564.49  Flavonoids  >=99%  20mg

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