Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步骤 返回列表页

Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步骤操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

细胞名称   Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步骤
形态特性 上皮样

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B细胞稳定表达Cas9-Flag-Puromycin，经2ug/ml嘌呤霉素筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；2ug/ml Puromycin

传代方法 消化3-5分钟；1:2传代；3天内可长满。

传代情况 C3

冻存条件 *培养基+8%DMSO

支原体检测 阴性

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；

同工酶

染色体

使用权限 A类

Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步骤细胞培养
1、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生*的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
人结肠平滑肌细胞RNAHCSMC miRNA5 μg

TNFRSF13C Others Mouse 小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人细胞裂解液 (阳性对照)

GIST 人胃肠道间质瘤细胞

CL-0434SC-1(小鼠胚胎细胞)5×106cells/瓶×2

人少突胶质细胞

人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RA 人直结肠平滑肌细胞*培养基 100mL
CD44 Others Human 人 CD44 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0464USMC(大鼠血管平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2

人肝内胆管上皮细胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg

5637(HTB-9)细胞，人膀胱癌细胞 大鼠肝癌细胞(癌细胞接种到肝脏成瘤),Walker-256细胞 MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞

HO-8910PM(人高转移卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2

hMSC-AT-c 人类脂肪组织间质干细胞(hMSC-AT) 500,000cells 小鼠背脊髓神经元MN-dsc
CL-0464USMC(大鼠血管平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2

CD44 Others Human 人 CD44 人细胞裂解液 (阳性对照)

人肝内胆管上皮细胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg

5637(HTB-9)细胞，人膀胱癌细胞 大鼠肝癌细胞(癌细胞接种到肝脏成瘤),Walker-256细胞 MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞

HO-8910PM(人高转移卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2

hMSC-AT-c 人类脂肪组织间质干细胞(hMSC-AT) 500,000cells 小鼠背脊髓神经元MN-dsc
化钠三糖铁250用于副溶血性弧菌的生化反应筛选(SN标准)incubationmedia化钠三糖铁250用于副溶血性弧菌的生化反应筛选(SN标准)  进口分装  腺苷；腺嘌呤核苷  Adenosine  号：  58-61-7  质量规格：  BR,>99%,细胞培养级

改良绿色酵母菌和真菌肉汤250用于饮料中真菌及酵母菌检测(Acumedia方法)incubationmedia改良绿色酵母菌和真菌肉汤250用于饮料中真菌及酵母菌检测(Acumedia方法)  进口分装  *（标准品）  At
人血管性血友病因子elisa试剂盒  进口分装  补骨脂宁;补骨脂异黄  Corylin  号：  53947-92-5  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人血管舒缓激肽elisa试剂盒  进口分装  补骨脂素（标准品）  Psoralen  号：  66-97-7  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人血管生长素elisa试剂盒  进口分装  苍术素（标准品）  Atractylodin  号：  55290-63-6  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人血管生成素样蛋白3elisa试剂盒  进口分装  *（标准品）  Bulley A  号：  107668-79-1  质量规格：  HPLC≥98%，标准品
Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步骤总蛋白（双缩脲或考马斯亮兰）检测  进口分装  22681-72-7  Danshensu  C9H10O5  198.17  Phenylpropanoids  >=98%  20mg

（半自动/手工）  进口分装  42719-32-4  Pedunculoside  C36H58O10  650.84  Triterpenoids  >=98%  20mg

诺沃克病毒荧光定量  进口分装  486-86-2  N-Methylcytisine  C12H16N2O  204.27  Alkaloids  >=98%  20mg

高纯度革兰氏阳性菌质粒中量提取试剂盒  进口分装  4431-01-0  Ligustilide  C12H14O2  190.24  Miscellaneous  >=98%  20mg

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