Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526实验方法 返回列表页

细胞名称   Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526实验方法
形态特性 圆形

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS；400ug/ml G418

传代方法 建议初始浓度2.0×105 cells/ml，1:3传代；4~5天１次。

传代情况 C3

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：26,26；D13S317：8,11；D16S539：10,10；D18S51：16,16；D19S433：14,16.2；D21S11：31,31；D2S1338：18,18；D3S1358：15,16；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：10,11；D8S1179：13,17；FGA：19,24；Penta E：10,10；TH01：7,7；TPOX：8,8；vWA：19,19；

同工酶

染色体

使用权限 A类

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Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526实验方法细胞培养
1、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生*的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526实验方法操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

TRIB2 Others Human 人 TRIB2 / TRB2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠成肌细胞;C2C12

Lec1细胞，卵巢细胞 人肝癌细胞,FL62891细胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1

POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人细胞裂解液 (阳性对照)
EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0386MPC-11(小鼠浆细胞瘤)5×106cells/瓶×2

小鼠气管平滑肌细胞*培养基 100mL

EJ人膀胱癌细胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(单核细胞白血病)
CL-0386MPC-11(小鼠浆细胞瘤)5×106cells/瓶×2

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠气管平滑肌细胞*培养基 100mL

EJ人膀胱癌细胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(单核细胞白血病)
乙酸-1-萘酯(>98%,BR)  进口分装  胶质瘤组织细胞

邻乙氧基苯甲醛(>98%,BR)  进口分装  肠动脉内皮细胞

对甲氧基苯乙(>98%,BR)  进口分装  小管上皮细胞

6-甲基(>98%，BR)  进口分装  肠动脉内皮细胞
溴化十六烷基*胺琼脂培养基(05药典)  进口分装  钙蛋白酶抑制剂I(进口)  Calpain Inhibitor I(ALLN)   号：  110044-82-1  质量规格：  ≥95%,美国进口

GetrimideAgarMedium  进口分装  DL-丙酰-DL-丙酸  DL-Ala-DL-Ala  号：  2867-20-1  质量规格：  0.97

抗生素检定培养基1号（高PH）(05药典)  进口分装  DL-丙酰-DL-正缬酸  DL-Alanyl-DL-norvaline  号：  2325-18-0  质量规格：  0.99

AntibioticAgar  进口分装  D-4-溴苯丙酸  4-Bromo-D-Phe-OH  号：  62561-74-4  质量规格：  0.98
Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526实验方法TryptoseSoyaAgar  进口分装  BOC-L-丝酸甲酯  Boc-Ser-OMe  号：  2766-43-0  质量规格：  BR

沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)  进口分装  芴甲氧羰基-L-天冬酸-1-叔丁酯  Fmoc-Asp(OH)-OtBu  号：  129460-09-9  质量规格：  >98.5%,BR

抑菌剂效力检查培养基  进口分装  固深红 GBC  Fast Garnet GBC Salt  号：  101-89-3  质量规格：  BS,90%

PPLO肉汤  进口分装  曲利苯蓝  Trypan Blue  号：  72-57-1  质量规格：  BS

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