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更新時間:2017-06-27 15:45:58瀏覽次數(shù):114次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538操作步驟操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 價格 |
貼壁生長 |
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538操作步驟
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使A549細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:8傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:29,29;D21S11:29,29;D2S1338:24,24;D3S1358:16,16;D5S818:11,11;D6S1043:11,13;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23,23;Penta E:7,11;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14,14;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
肝動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
TRIB2 Others Human 人 TRIB2 / TRB2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]
RBL-2H3細(xì)胞,白血病細(xì)胞 永生化鼻咽上皮細(xì)胞系,NP69-SV40T細(xì)胞 CL-0232TF-1(人血液白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2
TGFBI Others Human 人 BIGH3 / B
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0383MDA-MB-436(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人角膜上皮細(xì)胞總RNAHCEpiC tRNA
ZR75-1細(xì)胞,人癌細(xì)胞 129小鼠ES細(xì)胞,D3細(xì)胞 WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞
MV3(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HUAEC Pellet 人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞團塊 > 1 mio.cells 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基NM-prf
CL-0383MDA-MB-436(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人角膜上皮細(xì)胞總RNAHCEpiC tRNA
ZR75-1細(xì)胞,人癌細(xì)胞 129小鼠ES細(xì)胞,D3細(xì)胞 WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞
MV3(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HUAEC Pellet 人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞團塊 > 1 mio.cells 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基NM-prf
10× Taq Buffer With (NH4)2SO4 進(jìn)口分裝 狗惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞
氧化銅粉(>99%,BR) 進(jìn)口分裝 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
錳粉(>99%,BR) 進(jìn)口分裝 成骨細(xì)胞
硫酸奎寧水合物(>98%,BR) 進(jìn)口分裝 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
BrothAgarMedium 進(jìn)口分裝 麥芽糖醇 Maltitol 號: 585-88-6 質(zhì)量規(guī)格: >98%
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 進(jìn)口分裝 L-酰胺 L-Phenylalaninamide 號: 5241-58-7 質(zhì)量規(guī)格: >99%,BR
Ordinaryagarslantmedium 進(jìn)口分裝 L-蘇酸甲酯鹽酸鹽 L-Threonine methyl ester hydrochloride 號: 39994-75-7 質(zhì)量規(guī)格: 0.98
酪胨瓊脂 進(jìn)口分裝 N-乙酰-L-色酸乙酯 Ac-Trp-Oet 號: 2382-80-1 質(zhì)量規(guī)格: HPLC>98%,BR
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538操作步驟*鹽瓊脂(新藥典) 進(jìn)口分裝 DL-組酸鹽酸鹽 DL-Histidine•HCl 號: 123333-71-1 質(zhì)量規(guī)格: >98%,一水物,BR
察氏瓊脂 進(jìn)口分裝 L-羥基脯酸 L-Hydroxyproline 號: 51-35-4 質(zhì)量規(guī)格: >99%,BR
SabouraudBHIAgar 進(jìn)口分裝 醋酸組瑞林 Histrelin Acetate 號: 76712-82-8 質(zhì)量規(guī)格: BR,純度>98%
30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5) 進(jìn)口分裝 * Pranoprofen 號: 52549-17-4 質(zhì)量規(guī)格: >97%,BR
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538操作步驟現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
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