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所 在 地上海市
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更新時間:2017-06-27 15:05:22瀏覽次數(shù):269次
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適用領域 | 科研 |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0908實驗方法操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 價格 |
懸浮生長 |
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0908實驗方法
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一無精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0908實驗方法細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
293來源病毒包裝細胞;ΦA
大鼠周神經(jīng)成纖維細胞(RPNF)(5×105)
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3
615小鼠前胃癌瘤株;Fc 小鼠腎小管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse
CDH16 Others Human 人 CDH16 / Cadherin-16 人細胞裂解液 (陽性對照)
CANT1 Others Human 人 CANT1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0191RBE(人膽管癌細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
MS1小鼠胰島內皮細胞 MS1 mouse islet endothelial cells DMEM培養(yǎng)基+5%FBS
CLCF1 Protein Human 重組人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標簽)
RAG(小鼠腎腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 H08910(卵巢癌細胞)
CL-0191RBE(人膽管癌細胞)5×106cells/瓶×2
CANT1 Others Human 人 CANT1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
MS1小鼠胰島內皮細胞 MS1 mouse islet endothelial cells DMEM培養(yǎng)基+5%FBS
CLCF1 Protein Human 重組人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標簽)
RAG(小鼠腎腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 H08910(卵巢癌細胞)
人肌細胞生成素(MYOG)ELISAKit 進口分裝 α-去環(huán)己基-α-苯基奧昔布寧 α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin 號: 14943-53-4 質量規(guī)格: 美國進口
人β細胞素(BTC)ELISAKit 進口分裝 西他列汀基甲酰β-D-葡萄糖苷酸 Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide 號: 940002-59-5 質量規(guī)格: 美國進口
人細胞纖維連接蛋白(cFn)ELISAkit 進口
溶壁微球菌產(chǎn)抗生菌素支/瓶 進口分裝 溴酸鈉(> 98%,BC) Sodium bromated 號: 7789-38-0 質量規(guī)格: > 98%,BC
溶藻細菌產(chǎn)*支/瓶 進口分裝 次酸鈉溶液 Sodium hypochlorite solution 號: 7681-52-9 質量規(guī)格: Tech Grade
肉葡萄球菌支/瓶 進口分裝 *十二水(>98%,BR) Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrate 號: 10039-32-4 質量規(guī)格: >98%,BR
乳鏈球菌產(chǎn)殺蚜素,毒殺蚜蟲、紅蜘蛛及某些鱗翅目幼蟲。支/瓶 進口分裝 磷鎢酸鈉(>98%,BC) Sodium phosphotungstate, hydrate 號: 51312-42-6 質量規(guī)格: >98%,BC
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0908實驗方法大腸桿菌O157顯色瓊脂平板 進口分裝 蟲草素 標準品別名: 冬蟲夏草素、冬蟲夏草菌素、蛹蟲草菌素、蟲草菌素 英文名稱: Cordycepin 編號: 73-03-0
*麥康凱瓊脂平板 進口分裝 * 標準品別名: 土當歸酸、齊墩果醇酸、丁香油素 英文名稱: Oleanic acid 編號: 508-02-1
改良EC肉湯(mEC+n) 進口分裝 柴胡皂苷B2 標準品別名: 英文名稱: Saikosaponin B2 編號: 58316-41-9
MUG培養(yǎng)基 進口分裝 鹽酸 標準品別名: 消旋鹽酸 英文名稱: hydrochloride 編號:
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