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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928操作步驟

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更新時(shí)間:2017-06-27 15:02:39瀏覽次數(shù):221次

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細(xì)胞名稱(chēng)   EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1:2傳代;5-6天一次

傳代情況 P2

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 熒光法(-

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

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產(chǎn)品名稱(chēng)

生長(zhǎng)特性

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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928操作步驟

懸浮生長(zhǎng)

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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928操作步驟操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2

人膀胱平滑肌細(xì)胞(HBdSMC)( 5×105 )

CL-0163MSTO-211H(人肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人肺支氣管癌細(xì)胞;NCI-H1650 大鼠嗅鞘細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

raw264.7 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CD58 Others Human LFA-3 / CD58 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0180P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪裂解物HMSC-ad L

ER-30細(xì)胞,人癌細(xì)胞 大鼠腺癌細(xì)胞系,MADB106細(xì)胞 淋巴成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

B16-F1(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

NHEM.f M2 Pellet 正常人表皮黑素細(xì)胞團(tuán)塊(少年者),培養(yǎng)在M2培養(yǎng)液中 > 1 mio.cells 人氣管上皮細(xì)胞裂解物HTEpiCL
CL-0180P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CD58 Others Human LFA-3 / CD58 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪裂解物HMSC-ad L

ER-30細(xì)胞,人癌細(xì)胞 大鼠腺癌細(xì)胞系,MADB106細(xì)胞 淋巴成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

B16-F1(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

NHEM.f M2 Pellet 正常人表皮黑素細(xì)胞團(tuán)塊(少年者),培養(yǎng)在M2培養(yǎng)液中 > 1 mio.cells 人氣管上皮細(xì)胞裂解物HTEpiCL
人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISAKit  進(jìn)口分裝  硬脂酰胺(>90.0%(GC))  Stearamide  號(hào):  124-26-5  質(zhì)量規(guī)格:  >90.0%(GC)

人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISAKit  進(jìn)口分裝  癸二酸二甲酯(>97.0%(GC))  Dimethyl Sebacate  號(hào):  106-79-6  質(zhì)量規(guī)格:  >97.0%(GC)

人抗乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)ELISAKit  進(jìn)口分裝  2-代腺苷2',3'-縮丙  2-
灰樹(shù)花支/  進(jìn)口分裝  DSP  DSP  號(hào):  70539-42-3  質(zhì)量規(guī)格:  BR

渾濁紅球菌生物防治用菌。支/  進(jìn)口分裝  四乙酸二鈉一鹽  EDTA, disodium & mono salt  號(hào):  14402-88-1  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,BR

霍亂弧菌支/  進(jìn)口分裝  谷酸脫氫酶  Glutamate Dehydrogenase  號(hào):  2604152  質(zhì)量規(guī)格:  >10 U/mg,BC

雞腿蘑(毛頭鬼傘)產(chǎn)果膠酶,分離源:土壤。支/  進(jìn)口分裝  對(duì)羥基苯三唑  HOBT, 1-Hydroxybenzotriazole  號(hào):  2592-95-2  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928操作步驟紫牛乳  進(jìn)口分裝  (trans)-4-Propyl-1-methyl-L-proline  中文名稱(chēng):  (反)- 4-propyl-1-methyl-l-proline  編號(hào):  13380-36-4  分子結(jié)構(gòu)式:  C9H17NO2

OF(Hugh-leifson)  進(jìn)口分裝  1-(2-Hydroxyethylamino)-4-(methylamino)anthraquinone  中文名稱(chēng):  1 -2-- 4 -(甲基基)醌  編號(hào):  86722-66-9  分子結(jié)構(gòu)式:  C17H16N2O3

亞鹽(產(chǎn)氣進(jìn)口分裝  1-(3-Pyridyl)-1-bu-4-carboxylic Acid-d4  中文名稱(chēng):  1 -3-基)- 1-bu-4-carboxylic acid-d4  編號(hào):    分子結(jié)構(gòu)式:  C9H5D4NO3

(產(chǎn)氣進(jìn)口分裝  Anticefepime  中文名稱(chēng):  anticefepime  編號(hào):  97164-57-3  分子結(jié)構(gòu)式:  C19H24N6O5S2

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