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132次生物菌種實(shí)驗(yàn)中樣本的處理方法
1. 血清:全血標(biāo)本于室溫放置2小時或4℃后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢查,搜集 血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑舉薦運(yùn)用EDTA.Na2,標(biāo)本搜集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可 檢查。防止運(yùn)用溶血,高血脂標(biāo)本。
3. 安排勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖刷安排,以去掉殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞 會影響測量效果),稱重后將安排剪碎。將剪碎的安排與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的分量體積比,比方1g的安排樣本對應(yīng)9mL的PBS,詳細(xì)體積可依據(jù)試驗(yàn)需求恰當(dāng)調(diào)整,并做好記載。舉薦在PBS中參加蛋白酶抑制劑)參加玻璃勻漿器中,于冰上充沛研磨。為了進(jìn)一步裂解安排細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或重復(fù)凍融。zui終將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢查。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除掉雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢查。
5. 其它生物標(biāo)本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢查
6. 標(biāo)本應(yīng)清澈通明,懸浮物應(yīng)離心去掉。
7. 標(biāo)本搜集后若不及時檢查,請按一次運(yùn)用量分裝,凍存于-20℃/-80℃冰箱內(nèi),防止重復(fù)凍融, 1-6月內(nèi)檢查,4℃保留的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢查。
8. 如果您的樣本中檢查物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請依據(jù)實(shí)際情況,做恰當(dāng)倍數(shù)稀釋(主張先做 預(yù)試驗(yàn),以判定稀釋倍數(shù))。
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