慢病毒感染細(xì)胞，為什么你的效率那么低

   那綠色讓人看了神清氣爽。一陣涼爽的風(fēng)輕輕拂來，葉子“沙拉沙拉”地奏起了*的樂曲，伴著小鳥興奮而快樂的“嘰啾”聲，形成了一首美妙的自然交響樂?，F(xiàn)在為你介紹   慢病毒不但可感染分裂或非分裂細(xì)胞，還可將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而實(shí)現(xiàn)持久表達(dá)，又很少引發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)。被譽(yù)為「細(xì)胞實(shí)驗(yàn)首.xuan、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)*」工具病毒。

并且作為基因載體在治療各類遺傳性和后天性的人類疾病中倍受歡迎：從基礎(chǔ)研究發(fā)展到臨床階段，高濃度、高感染效率的慢病毒都是感染細(xì)胞表達(dá)（或沉默）目的基因的理想分子工具。

那么慢病毒在感染細(xì)胞中有什么優(yōu)良表現(xiàn)呢？

慢病毒感染細(xì)胞的步驟一般是這個(gè)樣子的，以「24 孔培養(yǎng)板、貼壁細(xì)胞」為例：

Day0: 接種細(xì)胞

每孔按 5×104 個(gè)待感染細(xì)胞鋪板，用含有 10% FBS 的 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng);

Day1: 細(xì)胞感染

感染前，根據(jù)說明書用*培養(yǎng)基配置感染液，備用吸掉舊培養(yǎng)基，更換為感染液; 并參考細(xì)胞 MOI 值，計(jì)算病毒使用量，加入病毒進(jìn)行感染，混勻;

Day2 

病毒感染 8~16 h 后，換回常規(guī)培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng);

Day3~4: 確認(rèn)感染效果

感染 72 h 后，顯微鏡下觀察感染效果，如 EGFP、Cherry 的表達(dá)情況；

如果都這么簡(jiǎn)單的話，那你真的是 too young too simple！ 

那么在慢病毒感染細(xì)胞過程中，到底會(huì)遇到哪些問題呢？此貼統(tǒng)統(tǒng)幫您搞定~~