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海洋微生物菌種實(shí)驗(yàn)樣本處理方法介紹

時(shí)間:2017/10/27閱讀:216
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海洋微生物菌種實(shí)驗(yàn)樣本處理方法介紹
1、血清樣本
血清是*常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本,處理也比較簡(jiǎn)單。
用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一晚,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
采血過(guò)程中應(yīng)避免溶血,因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)釋放具有過(guò)氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測(cè)中會(huì)有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測(cè)的不準(zhǔn)確性。同時(shí)也應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測(cè)的假陽(yáng)性。
2、血漿樣本
用含抗凝劑的*或離心管采集血液標(biāo)本,標(biāo)本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
常用的抗凝劑為EDTA、*和*等,檢測(cè)時(shí)還應(yīng)仔細(xì)閱讀試劑盒說(shuō)明書,檢查試劑盒是否對(duì)抗凝劑有特殊要求。
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
4、細(xì)胞裂解液
1)吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用*消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省略。
2)收集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。
3)加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需要150~250μL PBS重懸。
4)將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復(fù)凍融幾次,使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以達(dá)到裂解的目的。
5)4℃ 10000×g 離心10min,除去細(xì)胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
海洋微生物菌種小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒    Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒    Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫試劑盒    Mouse Bone Morphogenetic Protein 15,BMP-15 Elisa kit
小鼠骨保護(hù)素(OPG)免疫試劑盒    Mouse Osteoprotegerin,OPG ELISA KIT
小鼠*過(guò)氧化酶(GSH-Px)免疫試劑盒    Mouse glutathione peroxidase,GSH-Px ELISA Kit
小鼠*脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒    Mouse glutamic acid decarboxylase autoantibody IgM,GAD-Ab-IgM ELISA Kit
小鼠*脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒    Mouse glutamic acid decarboxylase autoantibody IgG,GAD-Ab-IgG ELISA Kit
小鼠*脫氫酶(GDH/GLDH)免疫試劑盒    Mouse Glutamate dehydrogenase,GDH/GLDH ELISA Kit
小鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒    Mouse orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒    Mouse Leptospira antibody(IgG)ELISA Kit
小鼠睪酮(T)免疫試劑盒    Mouse Testosterone,T ELISA Kit
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒    Mouse Methemoglobin,MHB ELISA Kit
小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒    Mouse High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit
小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)免疫試劑盒    Mouse Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit
小鼠高密度脂蛋白*(HDL-C)免疫試劑盒    mouse High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit
小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)免疫試劑盒    Mouse ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit
小鼠高爾基蛋白73(GP-73)免疫試劑盒    Mouse golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit
小鼠高半*(Hcy)免疫試劑盒    Mouse Homocysteine,HCY ELISA Kit
小鼠肝脂酶(HL)免疫試劑盒    Mouse hepatic lipase,HL ELISA Kit
小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒    Mouse liver type fatty acid binding protein,L-FABP ELISA Kit
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒    Mouse Hepatocyte Growth Factor Receptor,C-MET/HGFR ELISA Kit
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物(HGFAC)免疫試劑盒    Mouse Hepatocyte growth factor activator,HGFAC ELISA kit
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒    Mouse hepatocyte growth factor,HGF ELISA kit
小鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒    Mouse Triglyceride,TG ELISA Kit
小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒    Mouse glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH/G3PDH ELISA Kit
小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒    Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA kit海洋微生物菌種

 

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