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液相色譜-超高分辨質(zhì)譜助力重組AAV的序列覆蓋度和 分子量分析

閱讀:383      發(fā)布時(shí)間:2023-07-13
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重組腺病毒(rAAV)是一種廣泛使用的基因治療載體,目前共13種血清類(lèi)型被鑒定。AAV衣殼由60個(gè)拷貝的三種蛋白亞基組成,分別是VP1(大約80 kDa)、VP2(大約70 kDa)和VP3(大約60 kDa[1]。其中,VP2包含VP3的全部序列,VP1包含VP2的全部序列[2]。理論上VP1:VP2:VP3的質(zhì)量比例為1:1:10。由于三種亞基的序列相似但相對(duì)豐度相差較大,三種亞基在常規(guī)分離中容易共洗脫,導(dǎo)致VP1VP2的信號(hào)無(wú)法正常解析。在實(shí)際檢測(cè)的過(guò)程中,有些AAV樣品中VP1的含量極少,與VP3的比例甚至低于1:1000,導(dǎo)致VP1信號(hào)難以檢測(cè)。



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