我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

大鼠視網膜色素上皮細胞【Rat Eye: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)iNV人套膜蛋白規(guī)格：48T/96T 靈芝酸G HPLC≥98% 20mg

iso-Hyd人異規(guī)格：48T/96T 靈芝烯酸D HPLC≥98% 10mg

ISR-β人胰島素受體β規(guī)格：48T/96T 靈芝烯酸E HPLC≥98% 5mg

ITGαM/CD11b人整合素αM型規(guī)格：48T/96T 硫秋水仙苷 HPLC≥98% 20mg

Kim-1人腎損傷分子1規(guī)格：48T/96T 硫酸氨基葡萄糖 HPLC≥98% 20mg

Ks人受體酪氨酸激酶規(guī)格：48T/96T 硫酸長春堿 HPLC≥98% 20mg

LAM人脂阿拉伯甘露聚糖規(guī)格：48T/96T 硫酸長春新堿 HPLC≥98% 20mg

LBP人脂多糖結合蛋白規(guī)格：48T/96T 硫酸長春質堿 HPLC≥98% 20mg

Lebtospira兔鉤端螺旋體IgG規(guī)格：48T/96T 硫酸黃連堿 HPLC≥98% 20mg

LEPR人瘦素受體規(guī)格：48T/96T 硫酸金雀花堿 HPLC≥98% 20mg
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit 人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 水楊酸(AR)  Salicylic acid  質量規(guī)格：>99.5%,AR

Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISA試劑盒人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甲殼素；幾丁質  Chitin  質量規(guī)格：BR

植物組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50 輔酶 A  Coenzyme A, free acid, hydrate (COA)  質量規(guī)格：>85%,BR

Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 多效唑  Paclobutrazol  質量規(guī)格：>95%,BR

小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 ，英文名： BTA ELISA Kit 硫酸聯(lián)氨(AR)  Hydrazine sulfate  質量規(guī)格：>99%,AR

小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA檢測試劑盒MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 96T/48T 多酚氧化酶  Polyphenol Oxidase from Mushrooms  質量規(guī)格：>500 U/mg,BR

人肺炎衣原體抗體IgA(Cpn-IgA)試劑盒 Human Cpn-IgA ELISA Kit 硫酸銅五水(AR)  Copper(II) sulfate, pentahydrate  質量規(guī)格：AR,>99%

RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T N-乙酰-D-氨基葡萄糖  N-Acetyl-D-glucosamine  質量規(guī)格：>98%,BR

COLLAGENII蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 硫酸錳一水(AR)  Manganous sulfate monohydrate  質量規(guī)格：AR,>99%

Mousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISA試劑盒小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 氯化銣(分子生物學級)  Rubidium chloride  質量規(guī)格：>99%,分子生物學級
大鼠視網膜色素上皮細胞直銷蛋類總乳酸比色法定量檢測試劑盒20 靈芝酸Y HPLC≥98% 20mg

稻麥α淀粉酶活性DNS比色法定量檢測試劑盒20 靈芝酸TR HPLC≥95% 20mg

稻麥α淀粉酶活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑盒20 靈芝酸TQ HPLC≥95% 20mg

稻麥類食物DNA分離試劑盒10 靈芝酸TN HPLC≥98% 20mg

稻麥類食物DNA分離試劑盒10 靈芝酸SZ HPLC≥95% 20mg

稻米類植酸比色法定量檢測試劑盒20 靈芝酸S HPLC≥98% 20mg

等電聚焦蛋白電泳(IEF)10倍祛色溶液500毫升 靈芝酸N HPLC≥98% 20mg

等電聚焦蛋白電泳(IEF)10倍染色溶液500毫升 靈芝酸LM HPLC≥98% 20mg

等電聚焦蛋白電泳(IEF)10倍陽極電泳緩沖液500毫升 靈芝酸K HPLC≥95% 20mg

等電聚焦蛋白電泳(IEF)10倍陰極電泳緩沖液500毫升 靈芝酸I(標準品)  Ganoderic acid I  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。