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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作 | T25m2 | CS-963884 |
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞【Rat Vascular : Normal Saphenous Vein Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
人白介素4受體(IL4R/CD124)試劑盒 Human Ierleukin 4 receptor,IL4R/CD124 ELISA Kit 8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二鈉鹽水合物(>99.0%(HPLC)(T)) Di 8-Amino-1,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)
人白介素5(IL-5)試劑盒 Human IL-5 ELISA KIT 102(>97.0%(HPLC)(N)) Coumarin 102 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N)
人白介素5受體alpha(IL5RA)試劑盒 Human IL5RA ELISA kit 314(>98.0%(HPLC)(N)) Coumarin 314 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)
人白介素6(IL-6)試劑盒 Human IL-6 ELISA KIT 氯化熒光素(>90.0%(HPLC)) Fluorescein Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)
人白介素6受體(IL-6R)試劑盒 Human IL-6R ELISA Kit 2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC)) 2',7'-Dichlorofluorescein 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
人白介素7(IL-7)試劑盒 Human IL-7 ELISA kit 2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T)) 2,3-Diaminonaphthalene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
人白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 Human Ierleukin 8 ELISA KIT 甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N)) Dimidium Bromide 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(N)
人白介素8(IL-8/CXCL8)自身抗體試劑盒 Human ierleukin 8 aoaibody ELISA Kit 7-(二氨基)-4-(>95.0%(GC)(T)) 7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
人白介素增強(qiáng)子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)試劑盒 Human ILF2 ELISA kit 7-(二氨基)-4-三氟(>97.0%(GC)(T)) 7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarin 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
人白三烯B4(LTB4)試劑盒 Human Leukoiene B4,LT-B4 ELISA Kit 7-(二乙基氨基)-3-羧酸(>98.0%(GC)(T)) 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
小鼠趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL3L1 ELISA Kit 阿戈美拉?。?/span>II型) Agomelatine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,II晶型
豬白介素17(IL-17)ELISA檢測(cè)試劑盒Porcineierleukin17,IL-17ELISAKit 96T/48T 阿戈美拉?。?/span>I型) Agomelatine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,I晶型
大鼠壞死因子γ(TNF-γ)試劑盒 Rat tumor necrosis factor γ,TNF-γ ELISA Kit 吡拉西坦 Piracetam 質(zhì)量規(guī)格:>99%
英文名稱HumanAILR4ELISAKIT人AILR4規(guī)格:96T/48T 雷美替胺 Ramelteon 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
動(dòng)物組織冰凍切片糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(lán)(ALCIANBLUE)染色試劑盒50 拉科酰胺 Lacosamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%
SheepIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 米那普侖鹽酸鹽 Milnacipran 質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL1 ELISA Kit 米那普侖鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Milnacipran 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA檢測(cè)試劑盒swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit 96T/48T 丁苯那嗪 Tetrabenazine 質(zhì)量規(guī)格:>99%
大鼠壞死因子β(TNF-β)試劑盒 Rat Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA KIT 丁苯那嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetrabenazine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanAILR3(h)ELISAKIT人AILR3規(guī)格:96T/48T 氨己烯酸 Vigabatrin 質(zhì)量規(guī)格:>99%
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作大鼠微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)試劑盒 Rat microtubule-associated protein 2,MAP-2 ELISA Kit 氯化血根堿 HPLC≥98% 20mg
大鼠微纖絲相關(guān)糖蛋白3(MFAP3)試劑盒 Rat Microfibril-associated glycoprotein 3,MFAP3 ELISA kit 氯化纈草素 HPLC≥98% 0.1mL
大鼠維生素A(VA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatVitaminA,VAELISAKit 96T/48T 氯化天竺葵素O蕓香糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素A(VA)試劑盒 Rat Vitamin A,VA ELISA Kit 氯化天竺葵素,O雙葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素B12(VB12)ELISA檢測(cè)試劑盒RatVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T 氯化鍶六水 Strontium chloride, hexhydrate 質(zhì)量規(guī)格:AR,≥99%
大鼠維生素B12(VB12)試劑盒 Rat Vitamin B12,VB12 ELISA Kit 氯化鈰七水 Cerium (III) chloride, heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99.9%
大鼠維生素B6(VB6)ELISA檢測(cè)試劑盒RatVitaminB6,VB6ELISAKit 96T/48T 氯化矢車菊素O槐糖苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠維生素B6(VB6)試劑盒 Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 氯化矢車菊素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素C(VC)ELISA檢測(cè)試劑盒RatVitaminC,VCELISAKit 96T/48T 氯化矢車菊素,(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyanidin Chloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠維生素C(VC)試劑盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit 氯化矢車菊素 HPLC≥98% 20mg
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