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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞說明
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963883 |
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞【Rat Aorta: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNF 96T/48T 鹽酸甲氧那明(標(biāo)準(zhǔn)品) Methoxyphenamine HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 ,英文名: BDNF ELISA Kit 愈創(chuàng)木酚磺酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品) Potassium guaiacolsulfonate hemihydrate 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測(cè)定用
小鼠腦指蛋白(BFP)ELISA試劑盒 ,英文名: BFP ELISA Kit 棓丙酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Propyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠內(nèi)(ET)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseendotoxin,ET 96T/48T 氯美扎酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlormezanone 質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查
小鼠內(nèi)(ET)ELISA試劑盒 ,英文名: ET ELISA Kit 氫鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium hydrogenphosphate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定
小鼠腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGF 96T/48T 磺胺二甲嘧啶 (標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfamethazine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: EG-VEGF ELISA Kit 磺胺脒(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfaguanidine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
小鼠腺來源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: EG-VEGF ELISA Kit 芬布芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenbufen 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠內(nèi)磺肽α(ENSα)ELISA試劑盒 ,英文名: ENSα ELISA Kit 曲克蘆?。?biāo)準(zhǔn)品) Troxerutin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
小鼠內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒 ,英文名: ITLN1 ELISA Kit 二羥丙茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Diprophylline 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
大鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT 四氫生物蝶呤;沙丙蝶呤;(6R)-BH4 Tetrahydro-L-Biopterin (di) 質(zhì)量規(guī)格:>99%
英文名稱HumanMGα1ELISAKit人α1微球蛋白(MGα1)規(guī)格:96T/48T 安倍生坦 Ambrisentan 質(zhì)量規(guī)格:>98%
動(dòng)物組織β-半乳糖苷酶活性超敏熒光定量檢測(cè)試劑盒20 安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Ambrisentan 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Salmoncalcitonin,SCTELISA試劑盒鮭魚降鈣素(SCT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸決奈達(dá)隆 Dronedarone HCL 質(zhì)量規(guī)格:>99%,鹽酸鹽
小鼠趨化因子C-C-基元受體1(CCR1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCR1 ELISA Kit 決奈達(dá)隆(標(biāo)準(zhǔn)品) Dronedarone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
豬α干擾素(IFN-α)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcineIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T 雷諾嗪 Ranolazine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA KIT 雷諾嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Ranolazine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱Humanα1-AcidglycoproteinELISAKit人α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)規(guī)格:96T/48T 樂卡地平鹽酸鹽 Lercanidipine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%
動(dòng)物組織β-半乳糖苷酶活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測(cè)試劑盒20 樂卡地平鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Lercanidipine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
SheepComplemefragme3brccptor,C3bRELISA試劑盒綿羊補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸異丙嗪 Promethazine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞說明大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit 氯解磷定(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Pyridinealdoxime methochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratdeoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T 氯己定(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlorhexidine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
大鼠脫氧膠原交聯(lián)(DPD)試劑盒 Rat deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit 氯磺隆 Chlorosulfuron 質(zhì)量規(guī)格:>93%,BR
大鼠蛙皮素,雨蛙肽試劑盒 Rat Ceruletide/Cerulein/Caerulein ELISA Kit 氯磺酚S Sulfochlorophenol S calcium salt 質(zhì)量規(guī)格:顯色劑,96.0%
大鼠晚期糖基化端產(chǎn)物特異受體(AGER)試劑盒 Rat Advanced glycosylation end product-specific receptor,AGER ELISA kit 氯化熒光素(>90.0%(HPLC)) Fluorescein Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit 96T/48T 氯化銀(>99%,BC) Silver chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 Rat Peosidine ELISA Kit 氯化亞銅(>97%,BR) Copper(I) chloride 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
大鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)試劑盒 Rat advanced oxidation protein products,AOPP ELISA kit 氯化亞鐵四水(AR) Iron (II) chloride, tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
大鼠網(wǎng)膜素(omein)試劑盒 Rat omein ELISA Kit 氯化血紅素;血晶素 Hemin 質(zhì)量規(guī)格:0.98
大鼠微管蛋白β3(TUBB3)試劑盒 Rat Tubulin Beta-3 Chain,TUBB3 ELISA Kit 氯化血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Sanguinarine chloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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