小鼠膀胱上皮细胞操作 返回列表页

小鼠膀胱上皮细胞【Mouse Bladder：Normal Bladder Epithelial Cells】 产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

收到冻存细胞的处理方法：
1.37°C水浴预热培养基；
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻（解冻后不要继续暖细胞）；
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞，1000rpm离心5min；
4.弃上清，加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中，轻轻晃匀；
5.置于37°C，5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话，瓶盖不要拧太紧)；
6.第二天，用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
组蛋白H3-T110酸化检测试剂盒10/20等 2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶  2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol  质量规格：美国进口

组蛋白H3-T30酸化检测试剂盒10/20等 外消旋拉呋替丁  rac Lafutidine  质量规格：美国进口

组蛋白H3-T450酸化检测试剂盒10/20等 罗沙替丁  Roxatidine  质量规格：美国进口

组蛋白H3乙酰化检测试剂盒10/20等 普鲁卡因青霉素G  Penicillin G procaine  质量规格：美国进口

组蛋白H4-K12乙酰化检测试剂盒10/20等 苄星青霉素G  Penicillin G benzathine salt  质量规格：美国进口

组蛋白H4-K16乙酰化检测试剂盒10/20等 尼泊金异丁酯-d9  Isobutyl-d9 Paraben  质量规格：美国进口

组蛋白H4-K20(mono/di/i)化检测试剂盒10/20等 尼泊金异丁酯  Isobutyl Paraben  质量规格：美国进口

组蛋白H4-K31(mono)化检测试剂盒10/20等 尼泊金异丙酯  Isopropyl Paraben  质量规格：美国进口

组蛋白H4-K5乙酰化检测试剂盒10/20等 戊基尼泊金  Pentyl Paraben  质量规格：美国进口

组蛋白H4-K8乙酰化检测试剂盒10/20等 尼泊金丁酯-d9  Butyl-d9 Paraben  质量规格：美国进口
MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA试剂盒小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 米帕明/丙咪嗪  Clomipramine HCL   质量规格：>99%,BR

小鼠酸脱氢酶0酸酶(PDP)ELISA试剂盒 ，英文名： PDP ELISA Kit 米帕明/丙咪嗪（标准品）  Clomipramine HCL   质量规格：HPLC>98%,标准品

人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA检测试剂盒Humancytovillin/ezrinELISAKit 96T/48T 硫酸氢氯吡格雷 I型  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：>98%,I型

大鼠可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)试剂盒 Rat soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 硫酸氢氯吡格雷 II型(标准品)  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：>98%,标准品

英文名称RatBSAELISAKit大鼠的牛血清白蛋白残留检测规格：96T/48T 硫酸氢氯吡格雷 II型  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：含量97.0%-101.5%，II型

金黄色葡萄球菌肠E(Staphylococcusaureus:eerotoxinE)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 萘丁美酮/萘普酮  Nabumetone  质量规格：>99%

ELISAKitGROβ/CXCL2/MGSA人生长调节致癌基因β规格：48T/96T 萘丁美酮/萘普酮（标准品）  Nabumetone  质量规格：HPLC>98%,标准品

小鼠酸脱氢酶激酶同工酶4(PDK4)ELISA试剂盒 ，英文名： PDK4 ELISA Kit 地瑞拉韦  Darunavir  质量规格：>98%

人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA检测试剂盒Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 96T/48T 沃氏物  Methoxydienone  质量规格：含量≥85%

大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)试剂盒 Rat soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit DL-α-羟基戊二酸二钠  DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt   质量规格：98%,GC,进分sigma 94577
小鼠膀胱上皮细胞操作超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解样品制备试剂盒50 泼尼松龙钠  Prednisolone phosphate   质量规格：>97%,USP

超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 泼尼松龙（标准品）  Prednisolone  质量规格：HPLC>98%,标准品

超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 泼尼松龙  Prednisolone  质量规格：>98.5%,USP/BP

超氧化物歧化酶(SOD)细菌裂解样品制备试剂盒50 泼尼松(标准品)  Prednisone  质量规格：HPLC>98%,标准品

超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50 泼尼松  Prednisone  质量规格：>98%,USP30,BR

超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50 苹果酸脱氢酶(>12,000U/ml，BC)  Malate dehydrogenase  质量规格：>12,000U/ml，BC

超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50 苹果酸舒尼替尼(标准品)  Sunitinib Malate  质量规格：HPLC>98%,标准品

超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50 苹果酸舒尼替尼  Sunitinib Malate  质量规格：>99.0%,BR

超氧阴离子清除剂TEMPOL溶液1毫升/500毫摩尔 苹果酸 HPLC≥98% 20mg

沉淀法去内试剂盒20 平贝碱甲 HPLC≥98% 20mg
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。