小鼠肾小球内皮细胞说明 返回列表页

我公司提供原代细胞、细胞系、细胞株和菌种，细胞库管理规范，提供的细胞株背景清楚，提供参考文献和*培养条件。纯度可达 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

小鼠肾小球内皮细胞【Mouse Glomerular ：Normal Glomerular Endothelial Cells】产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞处理方法：
以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考，具体操作还需要根据到货时细胞密度，细胞生长状态等具体情况，酌情处理，如需要更详细技术指导，请及时电话或邮件联系。
一．贴壁细胞
客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2  培养。
二．悬浮细胞
1. 接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒）。
5. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2  培养VIP人血管活性肠肽规格：48T/96T 七叶皂苷 Purity≥98% 20mg

VK1人维生素K1规格：48T/96T 七叶皂苷A HPLC≥98% 10mg

VPI人血管活性肽酶抑制剂规格：48T/96T 七叶皂苷B HPLC≥98% 10mg

VWF人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子规格：48T/96T 七叶皂苷C HPLC≥95% 10mg

y-Ⅱ人胰蛋白酶原Ⅱ规格：48T/96T 七叶皂苷D HPLC≥95% 10mg

ypsin人胰蛋白酶规格：48T/96T 七叶皂苷Iia HPLC≥98% 10mg

亲环蛋白人肽酰脯氨酰异构酶规格：48T/96T 七叶皂苷IIb HPLC≥98% 10mg

ELISAKi人神经降压素规格：48T/96T 七叶皂苷钠 Purity≥98% 20mg

ELISA分析20样本 桤木酮 HPLC≥98% 20mg

ELISA*制备试剂盒10 漆黄素 HPLC≥98% 20mg
小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA检测试剂盒MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 96T/48T 西立伐他汀钠  Cerivastatin    质量规格：BR

人谷氨酸谷草转氨酶2，线粒体(谷草转氨酶2)(GOT2)试剂盒 Human GOT2 ELISA Kit 西替利嗪  Cetirizine 2HCl  质量规格：>98%，进口分装

RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸西曲瑞克  Cetrorelix Acetate  质量规格：>98%,BR

Arf6鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 白屈菜红碱  Chelerythrine  质量规格：>98%,分析标准品

MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA试剂盒小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸氯己定  Chlorhexidine Acatate  质量规格：>98%

小鼠酸性β葡萄糖苷酶(GBA)ELISA试剂盒 ，英文名： GBA ELISA Kit 氟伐他汀钠  Fluvastatin  salt  质量规格：>99%,BR

小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA检测试剂盒MouseP-SelectinELISAkit 96T/48T 氟伐他汀钠(标准品)  Fluvastatin  salt  质量规格：>99%,BR

人谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(GCLM)试剂盒 Human GCLM ELISA Kit 克林沙星  Clinafloxacin  质量规格：>98.5%

Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸左旋咪唑  Levamisole HCl  质量规格：>98%,BR

ATP酶法冰冻切片动物肌肉组织分型染色试剂盒20 盐酸左旋咪唑（标准品）  Levamisole HCl  质量规格：UV法含量测定
小鼠肾小球内皮细胞说明*化学封闭溶液10毫升 葡聚糖凝胶G-50;交联葡聚糖G-50(中颗粒)  Sephadex G-50  质量规格：分类范围3×100000

超声化鲑鱼精单链DNA10毫升 葡聚糖凝胶G-50;交联葡聚糖G-50(粗颗粒)  Sephadex G-50  质量规格：分类范围3×100000

超氧化物歧化酶(SOD)标准曲线测定试剂盒5 葡聚糖T  1g

超氧化物歧化酶(SOD)标准曲线测定试剂盒5 葡聚糖D70/右旋糖苷  Dextran D70  质量规格：Mw:63000~77000,USP32

超氧化物歧化酶(SOD)红细胞裂解样品制备试剂盒50 葡聚糖D20/右旋糖苷  Dextran D20  质量规格：MW:16000~24000

超氧化物歧化酶(SOD)红细胞裂解样品制备试剂盒50 扑热息痛/对乙酰氨基酚  Paracetamol（Acetaminofen polvo）  质量规格：>98.5%,BR

超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒(附标准样)50 扑热息痛(标准品)  Paracetamol（Acetaminofen polvo）  质量规格：HPLC>99%,标准品

超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒50 扑灭津(标准品)  Propazine  质量规格：分析标准品

超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒50 扑米酮（标准品）  Primidone  质量规格：检查

超氧化物歧化酶(SOD)活性酶动力比色法定量检测试剂盒(含标准样)50 扑草净  Prometryn  质量规格：>95%,BR
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。