當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人前脂肪細(xì)胞說明
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人前脂肪細(xì)胞說明 | T25m2 | CS-963779 |
人前脂肪細(xì)胞【Human Adipose: Preadipocytes】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
英文名稱RatsecretoryIgA大鼠分泌型IgA(sIgA)規(guī)格:96T/48T 灰黃霉素-13C,d3 Griseofulvin-13C,d3 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatsecretoryIgA大鼠分泌型IgA(sIgA)規(guī)格:96T/48T 多聚己糖透明質(zhì)酸 Hyaluronate Hexasaccharide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSerumamyloidA大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)規(guī)格:96T/48T 透明質(zhì)酸四糖 Hyaluronate Tetrasaccharide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSerumamyloidA大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)規(guī)格:96T/48T 鈉 Hydrocortisone phosphate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSHBG大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)規(guī)格:96T/48T 21-辛酸酯 Hydrocortisone 21-caprylate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSHBG大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)規(guī)格:96T/48T 21-半琥珀酸鈉鹽 Hydrocortisone 21-hemisuccinate salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSomatostatin大鼠生長抑素(SS)規(guī)格:96T/48T 3-(O-羧)肟 Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSomatostatin大鼠生長抑素(SS)規(guī)格:96T/48T 21-半琥珀酸酯 Hydrocortisone 21-hemisuccinate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSPE(IgG,M)大鼠抗抗體(SPE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 右美沙芬-d3 Dextromethorphan-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatSPE(IgG,M)大鼠抗抗體(SPE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 貝沙羅汀-d4 Bexarotene d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
RatPyridinoline,PYDELISA試劑盒大鼠酚(PYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 利托那韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Ritonavir 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠糖原0酸化酶L(PYGL)ELISA試劑盒 ,英文名: PYGL ELISA Kit 利托那韋 Ritonavir 質(zhì)量規(guī)格:>99%
豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA檢測試劑盒Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLAELISAKit 96T/48T 羅格列酮堿 Rosiglitazone base 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%
牛球蛋白G-2(IgG-2)試劑盒 Bovine Immunoglobulin G-2,IgG-2 ELISA Kit 羅格列酮堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Rosiglitazone base 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanActi-vatedproteinCELISAKit人活化蛋白C規(guī)格:96T/48T 馬來酸羅格列酮 Rosiglitazone Maleate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
動(dòng)物神經(jīng)組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 馬來酸羅格列酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Rosiglitazone Maleate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatPyruvateKinase,M2-PKELISA試劑盒大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 降鈣素;醋酸鮭魚降鈣素 Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠糖原0酸化酶B(PYGB)ELISA試劑盒 ,英文名: PYGB ELISA Kit 塞卡替尼 Saracatinib(AZD0530) 質(zhì)量規(guī)格:≥98.50%;Src抑制劑
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA檢測試劑盒GuineapigleukoieneD4,LT-D4ELISAKit 96T/48T 塞克硝唑 Secnidazole 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
牛球蛋白G-1(IgG-1)試劑盒 Bovine Immunoglobulin G-1,IgG-1 ELISA Kit 塞克硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Secnidazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人前脂肪細(xì)胞說明RatThyroxineaibody,TAbELISAKit大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氫氯噻嗪 Hydrochlorothiazide 質(zhì)量規(guī)格:度>99%,AR
RatTissuefactor,TFELISAKit大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氫化肉桂酸膽酯(>95.0%(GC)) Cholesterol Hydrocinnamate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氫化奎寧定;雙氫奎尼丁 Hydroquinidine 質(zhì)量規(guī)格:>95%
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鈉 Hydrocortisone phosphate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 琥珀酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydrocortisone succinate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T -d6 Prednisolone-d6 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 3-(O-羧)肟 Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 21-辛酸酯 Hydrocortisone 21-caprylate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 21-半琥珀酸酯 Hydrocortisone 21-hemisuccinate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
RatToll-likereceptor4,TLR4ELISAKit大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 21-半琥珀酸鈉鹽 Hydrocortisone 21-hemisuccinate salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
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