人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞【Human Skin: Normal Epidermal Keratinocytes】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratβ-Thromboglobulin,β-TG 96T/48T 琥珀酸多西拉敏(標(biāo)準(zhǔn)品)  Doxylamine succinate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠γ氨基(GABA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGamma-aminobyricacid,GABA 96T/48T 屈螺酮  Drospirenone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP grade

大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerferonγ,IFN-γ 96T/48T 屈螺酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Drospirenone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16 96T/48T 炔雌醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ethiny Estradiol  質(zhì)量規(guī)格：>98%標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatOrexinA 96T/48T 炔雌醇  Ethiny Estradiol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA檢測(cè)試劑盒RatmammarycarcinomaMarker-CA153 96T/48T 乙硫異煙胺,硫異煙胺  amide  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

大鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒 Rat mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 乙硫異煙胺,硫異煙胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  amide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratiduronatesulfatase,IDS 96T/48T 依曲韋林  Etravirine  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerleukin10,IL-10 96T/48T 法莫替丁  Famotidine  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠白介素18(IL-18)Elisa檢測(cè)試劑盒RatIerleukin18,IL-18 96T/48T 法莫替丁(標(biāo)準(zhǔn)品)  Famotidine  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
小鼠組織蛋白去乙?；?/span>(HD)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseHistoneDeacetylase,HDELISAKit 96T/48T 培美曲塞二鈉  Pemetrexed Di  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,水合物

人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)試劑盒 Human Sc1-70 Aibody,Sc1-70-Ab ELISA Kit 培美曲塞二鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pemetrexed Di  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 酞磺胺噻唑  Phthalylsulfathiazole  質(zhì)量規(guī)格：>95%

載玻片細(xì)胞NFKAPPABP50蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 匹格列酮  Pioglitazone base  質(zhì)量規(guī)格：>99%

LHELISA試劑盒魚(yú)促黃體激素規(guī)格：96T/48T 匹格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pioglitazone base  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 ，英文名： iNV ELISA Kit 匹格列酮鹽酸鹽  Pioglitazone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigIerleukin-12,IL-12/P70ELISAKIT 96T/48T 匹格列酮鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pioglitazone HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

牛內(nèi)皮細(xì)胞脂酶(EL)試劑盒 Bovine Endothelial Lipase,EL ELISA Kit 苯噻啶蘋(píng)果酸鹽  Pizotifen Malate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

英文名稱(chēng)HumanoponinIELISAKit人肌鈣蛋白-I(Tn-I)ELISAKit規(guī)格：96T/48T 硫酸多粘菌素B  Polymyxin B Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>6500 IU/mg,USP30

動(dòng)物腮腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 硫酸多粘菌素B(標(biāo)準(zhǔn)品)  Polymyxin B Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞說(shuō)明RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISA試劑盒大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲利苯藍(lán)  Trypan Blue  質(zhì)量規(guī)格：BS

Ratsolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲拉通X-405(69.0~71.0%)  Triton X-405  質(zhì)量規(guī)格：69.0~71.0%,Biotech Grade

RatSolubleprotein-100,S-100ELISAKit大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲拉通X-405  Triton X-405  質(zhì)量規(guī)格：70% in H2O

RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲拉通X-114  Triton X-114  質(zhì)量規(guī)格：BC

RatsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲拉通X-100  Triton X-100  質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)

Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲克蘆?。?biāo)準(zhǔn)品）  Troxerutin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲克蘆丁 HPLC≥98% 100mg

RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲古柳菌素A  Trichostatin A from Streptomyces sp  質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分

Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲格列酮  Troglitazone(CS-045)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

RatsolubleVascuolarcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 曲格列汀琥珀酸鹽   Trelagliptin succinate；SYR-472  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。