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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>RNA/DNA提取>> RNase-free EDTA Solution
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:RNase-free EDTA Solution
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號(hào):CP100572
產(chǎn)品規(guī)格:詳見說明
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
甲硝唑 ELISA試劑盒96TN4-Benzoylcytosine266613N4-苯甲酰基胞嘧啶
潑尼松龍 ELISA試劑盒96TN4-Benzoylcytidine1898N4-苯甲酰胞苷
阿苯達(dá)唑 ELISA試劑盒96TN4-Benzoyl'-deoxycytidine48363N4-苯甲?;?/span>'-脫氧胞苷
頭孢哌酮 ELISA試劑盒96TN1-Methyl-nitrobenzene,2-diamine419391
巴氏消毒 ELISA試劑盒96TN-[Bis(methylthio)methylene]- p-sulfonamide26515N-[雙(甲硫基)亞]對(duì)甲苯磺酰胺
小鼠髓過氧化物酶elisa試劑盒 小鼠髓過氧化物酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠髓過氧化物酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠髓過氧化物酶試劑盒、小鼠髓過氧化物酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 L-Ascorbic acid 中文名:L-抗壞血酸 分子式:C6H8O6 度:98.0%
小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 中文名:拉帕替尼 分子式:C29H26ClFN4O4S 度:98.0%
小鼠髓過氧化物酶(mouse MPO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Echinoynethiophene A 中文名: 分子式:C13H10O2S
小鼠髓過氧化物酶 英文名稱: Mouse Myeloperoxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MPO Lapachol 中文名:拉帕醇 分子式: 度:98.0%
小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 L-Carnosine 305-84-0 中文名:L-肌肽 分子式:C9H14N4O3
RNase-free EDTA Solution大豆甾醇B HPLC≥98% 5mg HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
大果桉醛 A HPLC≥98% 5mg BovineacetoneELISA試劑盒牛同檢測(cè)(acetone)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大果桉醛 C HPLC≥98% 5mg 魚肝油維生素A含量熒光定量檢測(cè)試劑盒20
大果桉醛 E HPLC≥98% 5mg MouseInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大果桉醛 H HPLC≥98% 5mg 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-C ELISA Kit
大果桉醛 I HPLC≥98% 5mg 小鼠蛋酸酶(PP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseProteinPhosphatase,PPELISAKit 96T/48T
大果桉醛 J HPLC≥98% 5mg 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒 Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit
大果桉醛 K HPLC≥98% 5mg RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大果桉醛 L HPLC≥98% 5mg 10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖+棉籽糖)100毫升
大果桉醛 N HPLC≥98% 5mg MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA試劑盒小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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