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人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4操作步驟

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更新時間:2017-05-16 20:28:22瀏覽次數(shù):207次

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人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4操作步驟現(xiàn)貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

細胞名稱     人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4操作步驟
形態(tài)特性      淋巴母細胞樣;圓形
生長特性     懸浮生長
特征特性      MOLT-4與MOLT-3來源于一名19歲的男性急性淋巴細胞性白血病的復發(fā)患者,該患者前期接受過多種藥物聯(lián)合化療。MOLT-4細胞系為T淋巴細胞起源,p53基因的第248位密碼子有一個G→A突變,不表達p53,不表達免疫球蛋白或EB病毒;可產(chǎn)生高水平的末端脫氧核糖轉移酶;表達CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)。 
培養(yǎng)條件      RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法      維持細胞濃度在4×105/ml~2×106/ml;根據(jù)細胞濃度每2~3天補液1次。
傳代情況     C5
凍存條件      基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測     培養(yǎng)法(-)
STR      Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12,13;D13S317:12,13;D16S539:11,14;D18S51:13,17;D19S433:14,15;D21S11:28,29,30,31;D2S1338:23,24;D3S1358:14,16;D5S818:12;D7S820:8,10,11;D8S1179:9,14;FGA:22,23,25;TH01:6,8;TPOX:8;vWA:17,18
同工酶     
染色體      84~89
使用權限     A類
人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
小鼠P物質(SP)免疫試劑盒    Mouse Substance P,SP ELISA Kit
豚鼠白介素13(IL-13)免疫試劑盒    Guinea pig interleukin 13,IL-13 ELISA Kit
豚鼠白介素12(IL-12/P70)免疫試劑盒    Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA KIT
豚鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒    Guinea pig interleukin 10,IL-10 ELISA Kit
豚鼠白介素1(IL-1)免疫試劑盒    Guinea Pig Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit
豚鼠白蛋白免疫試劑盒    Guinea Pig Albumin ELISA Kit
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒    guinea pig Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
豚鼠α干擾素(IFN-α)免疫試劑盒    Guinea Pig Interferon α,IFN-α ELISA Kit
豚鼠P物質(SP)免疫試劑盒    Guinea pig Substance P,SP ELISA Kit
豚鼠Ⅱ型肺泡細胞表面抗原(KL-6)免疫試劑盒    Guinea pig KL-6 (Krebs yon den Lundgen-6) ELISA Kit
豚鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)免疫試劑盒    Guinea pig 25-hydroxy vitamin D3,25 HVD3 ELISA kit

白介素11(IL-11)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL-11 ELISA Kit
白介素10(IL-10)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL-10 ELISA Kit
白介素1(IL-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL-1 ELISA Kit
白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA試劑盒    ,英文名:    Diphtheria Ab ELISA Kit
白蛋白(ALB)ELISA試劑盒    ,英文名:    ALB ELISA Kit
靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒    ,英文名:    TR ELISA Kit
八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒    ,英文名:    OTF2B ELISA Kit
人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4操作步驟八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒    ,英文名:    OTF2A ELISA Kit
艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA試劑盒    ,英文名:    IDS ELISA Kit
癌癥促凝素(CP)ELISA試劑盒    ,英文名:    CP ELISA Kit
癌胚鐵蛋白(CEF)ELISA試劑盒    ,英文名:    CEF ELISA Kit

 

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