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人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage操作步驟

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人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細(xì)胞名稱      人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage操作步驟
形態(tài)特性       上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性      貼壁生長(zhǎng)
特征特性       293細(xì)胞是人胚胎腎細(xì)胞用剪切過的腺病毒5 DNA轉(zhuǎn)化得到。它們包含并表達(dá)腺病毒5的早期區(qū)段1。 它們包含并表達(dá)腺病毒5的早期區(qū)段1。 它們能互補(bǔ)E1失活的腺病毒突變株和載體,使其生長(zhǎng)。 在DNA轉(zhuǎn)染檢測(cè)中它們是特別有效的受體細(xì)胞。 對(duì)于大多數(shù)即使不是全部人腺病毒的生長(zhǎng)和溶菌斑測(cè)試,它們也表現(xiàn)很好。 這些細(xì)胞廣泛應(yīng)用于因缺失或代換E1序列引起的E1失活突變株和腺病毒載體的繁殖與滴定。 因此它們被用來構(gòu)建腺病毒載體。 用于構(gòu)建腺病毒載體使用低代數(shù)細(xì)胞,一般不超過40代。 對(duì)于保持這株細(xì)胞的優(yōu)良特性,正確 
培養(yǎng)條件       MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法       消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況      P(27+5)
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)      陰性
STR      
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      A類 
人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長(zhǎng)或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
小鼠胰淀素(Amylin)免疫試劑盒    Mouse Amylin ELISA Kit
小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)免疫試劑盒    Mouse islet cell antibody,ICA ELISA Kit
小鼠胰島素(INS)免疫試劑盒    Mouse Insulin,INS ELISA Kit
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)免疫試劑盒    Mouse trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit
小鼠胰蛋白酶-1(trypsin-1)免疫試劑盒    Mouse trypsin-1 ELISA Kit
小鼠胰蛋白酶(trypsin)免疫試劑盒    Mouse trypsin ELISA Kit
小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)免疫試劑盒    Mouse pancreatic alpha amylase,AMY2A ELISA kit
小鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒    Mouse Carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)免疫試劑盒    Mouse nitric oxide synthase,NOS ELISA Kit
小鼠一氧化氮(NO)免疫試劑盒    Mouse Nitric Oxide,NO ELISA Kit
小鼠葉酸(FA)免疫試劑盒    Mouse Folic acid,FA ELISA Kit
小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)免疫試劑盒    Mouse oxidizided glutathione,GSSG ELISA Kit

 可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒    ,英文名:    sCD14 ELISA Kit
可溶性CD105(sCD105)ELISA試劑盒    ,英文名:    sCD105 ELISA Kit
可溶性CD100(sCD100)ELISA試劑盒    ,英文名:    sCD100 ELISA Kit
顆粒體蛋白(GRN)ELISA試劑盒    ,英文名:    GRN ELISA Kit
顆粒溶素(GNLY)ELISA試劑盒    ,英文名:    GNLY ELISA Kit
人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA試劑盒    ,英文名:    Apo A1 ELISA Kit
人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T細(xì)胞活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒    ,英文名:    TAP ELISA Kit
人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage操作步驟人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)ELISA試劑盒    ,英文名:    anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab ELISA Kit
人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒    ,英文名:    AIRA ELISA Kit
人抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒    ,英文名:    AT ELISA Kit

 

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