當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>> 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET說明書
細胞名稱 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET說明書
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞來源于293細胞,可以表達SV40T和EBNA1。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:6傳代;2天1次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET說明書復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET說明書細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應(yīng), 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
豬Tau蛋白免疫試劑盒 Pig Tau Proteins ELISA kit
豬Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒 Pig Syndecan-1/CD138,SDC1 ELISA Kit
豬S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒 Pig Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit
豬p物質(zhì)(SP)免疫試劑盒 Pig Substance P,SP ELISA Kit
豬P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)免疫試劑盒 Pig Cytochrome P450 Side Chain Cleavage Enzyme,P450scc ELISA kit
豬N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)免疫試劑盒 Pig N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
豬Na+/K+-ATP酶(Na/K ATPase)免疫試劑盒 Pig Na+/K+-ATPase ELISA kit
豬L-乳酸脫氫酶(L-LDH)免疫試劑盒 Pig L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit
豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒 Pig E-Selectin ELISA kit
豬D-乳酸脫氫酶(D-LDH)免疫試劑盒 Pig D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit
豬D二聚體(D2D)免疫試劑盒 Pig D-Dimer,D2D ELISA Kit
磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒 ,英文名: PIPLC ELISA Kit
磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒 ,英文名: PLCγ1 ELISA Kit
磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 ,英文名: PLC ELISA Kit
磷脂轉(zhuǎn)運蛋白(PLTP)ELISA試劑盒 ,英文名: PLTP ELISA Kit
磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)ELISA試劑盒 ,英文名: PITPNB ELISA Kit
磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒 ,英文名: PGM ELISA Kit
磷酸酶PP2A癌性抑制物(CIP2A)ELISA試劑盒 ,英文名: CIP2A ELISA Kit
磷酸激酶1(PGK1)ELISA試劑盒 ,英文名: PGK1 ELISA Kit
磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 ,英文名: PI3K ELISA Kit
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET說明書磷酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒 ,英文名: PaCoA ELISA Kit
磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒 ,英文名: pAMPK ELISA Kit
磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 ,英文名: AMPK ELISA Kit
磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 ,英文名: pERK ELISA Kit
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