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人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC實(shí)驗(yàn)方法
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN操作步驟
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC培養(yǎng)
細(xì)胞名稱 血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 T/G HA-VSMC細(xì)胞建系于1992年(Tilberg A F,et al)。該細(xì)胞系屬有限細(xì)胞系,可因連續(xù)傳代而衰老死亡。連續(xù)傳代試驗(yàn)顯示,T/G HA-VSMC細(xì)胞經(jīng)歷15-20個(gè)群體倍增時(shí)間就會(huì)衰老死亡,固需控制有限的傳代次數(shù)。
培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS;加多種生長(zhǎng)因子,詳見(jiàn)參考文獻(xiàn)
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC說(shuō)明書(shū)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)ELISA試劑盒 ,英文名: MAP1LC3B ELISA Kit
微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A(MAP1LC3A)ELISA試劑盒 ,英文名: MAP1LC3A ELISA Kit
微管微絲交聯(lián)因子1(MACF1)ELISA試劑盒 ,英文名: MACF1 ELISA Kit
微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(ABCC3)ELISA試劑盒 ,英文名: ABCC3 ELISA Kit
微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(ABCC2)ELISA試劑盒 ,英文名: ABCC2 ELISA Kit
網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 ,英文名: omentin ELISA Kit
晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒 ,英文名: AOPP ELISA Kit
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒 ,英文名: RAGE/AGER ELISA Kit
晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒 ,英文名: AGEs ELISA Kit
外顯肽(extein)ELISA試劑盒 ,英文名: extein ELISA Kit
蛙皮素(BBS)ELISA試劑盒 ,英文名: BBS ELISA Kit
唾液酸(SA)ELISA試劑盒 ,英文名: SA ELISA Kit
唾液過(guò)氧化物酶(SP)ELISA試劑盒 ,英文名: SP ELISA Kit
百合科玉簪屬植物玉簪 Hosta plantaginea(Lam.)Aschers.的花 Kaempferol-7-O-β-D -glucopyranoside 酚-7-O-Β-D- 葡萄糖苷 16290-07-6 C21H20O11 ≥98%
百合科沿階草屬植物麥冬 Ophiopogon japonicus(Thunb.)Ker-Gawl.的干燥塊根 Methylophiopogonanone A 甲基麥冬二氫高異黃酮A 74805-92-8 C19H18O6 ≥98%
百合科沿階草屬植物麥冬 Ophiopogon japonicus(Thunb.)Ker-Gawl.的干燥塊根 Methylophiopogonanone B 甲基麥冬二氫高異黃酮B 74805-91-7 C19H20O5 ≥98%
百合Lilium brownii var Colchicine 秋水仙素 64-86-8 C22H25NO6 ≥98%
百部Stemona tuberosa Neotuberostemonine 新對(duì)葉百部堿 143120-46-1 C22H33NO4 ≥98%
百部Stemona sessilifolia (Miq.) Miq Protostemonine 原百部堿 27495-40-5 C23H31NO6 ≥98%
百部Stemona sessilifolia (Miq.) Miq Protostemotinine 原百部次堿 169534-85-4 C23H29NO6 ≥98%
白芷Angelica dahurica Alloimperatorin 別歐前胡內(nèi)酯 642-05-7 C16H14O4 ≥98%
血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC說(shuō)明書(shū)白芷 A. dahurica (Fisch.) Benth. et Hook Heraclenol 白芷屬腦 31575-93-6 C16H16O6 ≥98%
白芷 A. dahurica (Fisch.) Benth. et Hook Isoimperatorin 異歐前胡素 482-45-1 C16H14O4 ≥98%
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