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人正常肝細胞;L-02操作步驟

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更新時間:2017-05-16 15:12:20瀏覽次數(shù):148次

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人正常肝細胞;L-02操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細胞名稱      人正常肝細胞;L-02操作步驟
形態(tài)特性       上皮細胞樣
生長特性      貼壁生長
特征特性       L - 02細胞建系鑒定于1980年(葉秀珍等,1980)。該細胞是一株正常肝細胞系,具有典型的肝細胞形態(tài)學特征,可用于多種實驗研究。  
培養(yǎng)條件       MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法       1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況      C72
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      陰性
STR       STR鑒定
同工酶      
染色體      
人正常肝細胞;L-02操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應(yīng), 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
人正常肝細胞;L-02操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
 胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA試劑盒    ,英文名:    GCA ELISA Kit
胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒    ,英文名:    ProGRP ELISA Kit
胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒    ,英文名:    GRP ELISA Kit
胃泌素(Gastrin)ELISA試劑盒    ,英文名:    Gastrin ELISA Kit
胃泌素(GAS)ELISA試劑盒    ,英文名:    GAS ELISA Kit
胃動素(MTL)ELISA試劑盒    ,英文名:    MTL ELISA Kit
胃動蛋白2(GKN2)ELISA試劑盒    ,英文名:    GKN2 ELISA Kit
胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒    ,英文名:    PG-C ELISA Kit
胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒    ,英文名:    PG-A ELISA Kit
胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PP ELISA Kit
胃蛋白酶(PG)ELISA試劑盒    ,英文名:    PG ELISA Kit
胃蛋白酶(GT)ELISA試劑盒    ,英文名:    GT ELISA Kit
未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒    ,英文名:    CpG-ODN ELISA Kit

半邊旗Pteris semipinnata    ent-9-Hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid    等效-9-羥基-15-氧代-16-貝殼杉烯-19-酸    77658-39-0    C20H28O4    ≥98.5%
半邊旗Pteris semipinnata    ent-9-Hydroxy-15-oxokauran-19-oic acid    等效-9-羥基-15-氧代-19-異貝殼杉烷酸    77658-45-8    C20H30O4    ≥98%
半邊旗Pteris semipinnata    Pterisolic acid A    none    none    C20H26O5    ≥98%
板藍根I. indigotica Fort.    Epigoitrin    表告依春    1072-93-1    C5H7NOS    ≥98%
板藍 Baphicacanthus cusia (Nees) Bremek    Indirubin    靛玉紅    479-41-4    C16H10N2O2    ≥98%
板凳果Pachysandra axillaris    Axillaridine A    矮陀陀酰胺堿 A    128255-16-3    C30H42N2O2    ≥98%
人正常肝細胞;L-02操作步驟板凳果Pachysandra axillaris    Friedelanol    表木栓醇    5085-72-3    C30H52O    ≥99%
板凳果Pachysandra axillaris    Pachyaximine A    矮陀陀胺堿 A    128255-08-3    C24H41NO    ≥95%

 

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