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人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC實(shí)驗(yàn)方法
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN操作步驟
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC培養(yǎng)
細(xì)胞名稱 人胚胎,皮膚,肌肉;M-7操作步驟
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚胎,皮膚,肌肉;M-7操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人胚胎,皮膚,肌肉;M-7操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 ,英文名: N-TSH ELISA Kit
新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒 ,英文名: NEOP ELISA Kit
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒 ,英文名: ZnT6 ELISA Kit
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(ZnT4)ELISA試劑盒 ,英文名: ZnT4 ELISA Kit
鋅指蛋白R(shí)IZ(PRDM2)ELISA試劑盒 ,英文名: PRDM2 ELISA Kit
鋅指蛋白644(ZNF644)ELISA試劑盒 ,英文名: ZNF644 ELISA Kit
鋅α2糖蛋白(AZGP1)ELISA試劑盒 ,英文名: AZGP1 ELISA Kit
心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒 ,英文名: h-FABP ELISA Kit
心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒 ,英文名: ANP ELISA Kit
心納素(ANF)ELISA試劑盒 ,英文名: ANF ELISA Kit
心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 ,英文名: CT-1 ELISA Kit
心肌細(xì)胞膜B1-AR(B1-AR)ELISA試劑盒 ,英文名: B1-AR ELISA Kit
心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒 ,英文名: cTnT ELISA Kit
心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒 ,英文名: ANKRD1 ELISA Kit
心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒 ,英文名: CMLC-1 ELISA Kit
博落回Macleaya cordata Allocryptopine 別隱品堿 485-91-6 C21H23NO5 ≥98%
鞭打繡球Hemiphragma heterophyllum Tricin 苜蓿素 520-32-1 C17H14O7 ≥98.5%
蝙蝠葛Menispermun dauricum DC. Dauricinoline 蝙蝠葛新諾林堿 30984-80-6 C37H42N2O6 ≥98%
蝙蝠葛Menispermun dauricum DC. Daurinoline 蝙蝠葛醇靈 2831-75-6 C37H42N2O6 ≥98%
蝙蝠葛 Menispermun dauricum DC. Dauricine 蝙蝠葛堿 524-17-4 C38H44N2O6 ≥98%
蝙蝠葛 Menispermun dauricum DC. Daurisoline 蝙蝠葛蘇林堿 70553-76-3 C37H42N2O6 ≥98%
人胚胎,皮膚,肌肉;M-7操作步驟蝙蝠葛 Menispermun dauricum DC. Menisdaurin 蝙蝠葛氰苷 67765-58-6 C14H19NO7 ≥98%
蓽苃Piper longum 3-Chloro-4-hydroxypiperidin-2-one 3-氯-4-羥基哌啶-2-酮 174204-83-2 C5H8ClNO2 ≥95%
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