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人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC實(shí)驗(yàn)方法
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN操作步驟
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC培養(yǎng)
細(xì)胞名稱 人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1操作步驟
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 取材自引產(chǎn)的15周胚胎組織,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:12;D18S51:13,20;D19S433:14.2,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,20;D3S1358:14,15;D5S818:12,13;D7S820:10;D8S1179:13,14;FGA:21,23;TH01:7,9;TPOX:9,10;vWA:16;
同工酶
染色體 46,XY
使用權(quán)限 A類
人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長(zhǎng)或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
粗枝崖摩Amoora dasyclada Laxiracemosin H 3-[(5alpha,13alpha,14beta,17alpha)-4,4,14-*基-3-氧代雄甾-7-烯-17-基]-1H-吡咯-2,5-二酮 1241871-28-2 C26H35NO3 ≥95%
粗枝崖摩Amoora dasyclada 3-Oxo-24,25,26,27- tetranortirucall-7-en-23,21-olide 3-氧代-24,25,26,27-四去甲甘遂-7-烯-23(21)-內(nèi)酯 828935-47-3 C26H38O3 ≥95%
粗枝崖摩Amoora dasyclada Squalene-2,3-diol 三十碳六烯-2,3-二醇 14031-37-9 C30H52O2 ≥95%
粗糠柴Mallotus philippensis Mallorepine 1,4-二氫-1-甲基-4-氧代-3-吡啶甲腈 767-98-6 C7H6N2O ≥95%
蓯蓉 Cistanche deserticola Y.C.Ma Isoacteoside 異麥角甾苷 61303-13-7 C29H36O15 ≥98%
刺五加Acanthopanax Senticosu Eleutheroside A 刺五加苷 A 474-58-8 C35H60O6 ≥98%
刺五加Acanthopanax Senticosu Eleutheroside B 紫丁香酚甙(刺五加苷B) 118-34-3 C17H24O9 ≥98%
刺五加 Radix Acanthopanacis Senticosl Hedera saponin B 刺五加葉中 36284-77-2 C59H96O25 ≥98%
刺五加 Manyprickle Acanthopanax Root 2”-O-Galloylhyperin 2”-O-沒食子酰基金絲桃甙 53209-27-1 C28H24O16 ≥98%
刺五加 Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms Acanthopanax senticosides B 刺五加皂苷B 114902-16-8 C58H92O25 ≥98%
Phospho-PAK1 + PAK2 磷酸化p21激活激酶1/2抗體
Phospho-PAK1 + PAK2 + PAK3 磷酸化p21激活激酶1/2抗體
Phospho-PAK2 磷酸化p21激活激酶2抗體
PLCG 2 磷酯酶Cγ2抗體
Phospho-PEA15 磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體
Phospho-PEA15 磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體
Pan Cytokeratin 廣譜細(xì)胞角蛋白PCK抗體
Pectinesterase 果膠酶抗體
PRPF4 PRPF4蛋白抗體
Penicillin G 青霉素G抗體
Phospholipase C beta 1 磷酯酶Cβ1抗體
PSRC1 富含脯氨酸/絲氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體
p47-phox NADPH氧化酶活化蛋白p47抗體
Proteasome 19S S7 蛋白酶體PRS7抗體
人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1操作步驟Proteasome 20S C2 蛋白酶體PSMα1抗體
Proteasome 20S alpha 2 蛋白酶體PSMα2抗體
Proteasome 20S alpha 6 蛋白酶體PSMα6抗體
PSMA7 蛋白酶體PSMα7抗體
PIBF1 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體
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