當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>感受態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞>> GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20-生命科學(xué)儀器
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更新時(shí)間:2019-09-20 16:18:48瀏覽次數(shù):220次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100-生命科學(xué)儀器
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20-生命科學(xué)儀器
JM109 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20-生命科學(xué)儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20-生命科學(xué)儀器
購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20 |
包裝 | 50ul*20 |
分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
shēng huà shì jì 糖原Ⅱ 容量: 500克
shēng huà shì jì 糖原 容量: 100克
shēng huà shì jì 糖元染液 容量: 20片/箱
shēng huà shì jì 糖化血清蛋白測試盒(果糖胺法,帶標(biāo)準(zhǔn)) 容量: 1000支/包
shēng huà shì jì 糖化血紅蛋白測試盒 容量: RT 1000支/包
shēng huà shì jì 糖化酶 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯 容量: RT,避光 25克
shēng huà shì jì 糖、醇發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ) 容量: RT 500克
GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20shēng huà shì jì 碳酸銀 容量: 100克
shēng huà shì jì 碳酸銅 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 碳酸鍶 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 碳酸銫 容量: RT 10克
shēng huà shì jì *瓊脂基礎(chǔ) 容量: 100克
shēng huà shì jì * 容量: 1克
shēng huà shì jì 碳酸氫鉀 容量: 5克
shēng huà shì jì 碳酸氫銨 容量: 1克
shēng huà shì jì 碳酸鉛 容量: 100克
shēng huà shì jì 碳酸錳 容量:
PAP 大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 規(guī)格: 48T/96T
FN 大鼠纖連蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Cyclin-D3 大鼠細(xì)胞周期素D3 規(guī)格: 48T/96T
Cyclin-D2 大鼠細(xì)胞周期素D2 規(guī)格: 48T/96T
Cyclin-D1 大鼠細(xì)胞周期素D1 規(guī)格: 48T/96T
CYP2E1 大鼠細(xì)胞色素P4502E1 規(guī)格: 48T/96T
CYP450 大鼠細(xì)胞色素P450 規(guī)格: 48T/96T
Cyt-C 大鼠* 規(guī)格: 48T/96T
ICAM-3/CD50 大鼠細(xì)胞間粘附分子3 規(guī)格: 48T/96T
ICAM-2/CD102 大鼠細(xì)胞間粘附分子2 規(guī)格: 48T/96T
ICAM-1/CD54 大鼠細(xì)胞間粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
Pentosidine 大鼠戊糖素 規(guī)格: 48T/96T
MTL 大鼠胃動(dòng)素 規(guī)格: 48T/96T
Pepsin 大鼠* 規(guī)格: 48T/96T
大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA Kit,48T/96T 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
VK1 大鼠*1 規(guī)格: 48T/96T
VE 大鼠* 規(guī)格: 48T/96T
VD3 大鼠*3 規(guī)格: 48T/96T
VD2 大鼠*2 規(guī)格: 48T/96T
VD 大鼠* 規(guī)格: 48T/96T
VC 大鼠* 規(guī)格: 48T/96T
VB6 大鼠*6 規(guī)格: 48T/96T
VB12 大鼠*12 規(guī)格: 48T/96T
25克
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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