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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

shēng huà shì jì 吐溫40 容量： 2～8℃ 10克

shēng huà shì jì 吐溫20 容量： 10克

shēng huà shì jì 土耳其紅油 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 透析用玻璃紙 容量： 保存：-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì 透析袋夾 容量： 1條

shēng huà shì jì 透析袋8DM,10MD 容量： 保存：-20℃ 1000u

shēng huà shì jì 透析袋7000 容量： HC1000u

shēng huà shì jì 透析袋6000 容量： 1000u

shēng huà shì jì 透析袋4000 容量： 200u

GT115 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50shēng huà shì jì 透析袋36DM,44MD 容量： LC200u

shēng huà shì jì 透析袋3500 容量： 1000u

shēng huà shì jì 透析袋3000 容量： 200u

shēng huà shì jì 透析袋27DM,34MD 容量： 保存：-20℃ LC200u

shēng huà shì jì 透析袋20DM,25MD 容量： LC1000u

shēng huà shì jì 透析袋17，8DM,77MD 容量： LC1000u

shēng huà shì jì 透明質(zhì)酸鈉 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 透明質(zhì)酸酶 容量： RT 1克

shēng huà shì jì *鈉 容量： 25克

shēng huà shì jì *鈉 容量： RT 5克

shēng huà shì jì *C鋅鹽 容量： 5克

shēng huà shì jì 銅鐵試劑 容量： 100克

shēng huà shì jì 銅絲 容量： 2～8℃ 25克

shēng huà shì jì 銅片 容量： 2～8℃ 1克

shēng huà shì jì 銅粉 容量： 2～8℃ 500

 TpP 大鼠血栓前體蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TM 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CH50 大鼠血清總補(bǔ)體 規(guī)格： 48T/96T

 NO 大鼠血清一氧化氮 規(guī)格： 48T/96T

 SAA 大鼠血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 GMP-140 大鼠血漿α顆粒膜蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 HO-2 大鼠血紅素氧合酶2 規(guī)格： 48T/96T

 HO-1 大鼠血紅素氧合酶1 規(guī)格： 48T/96T

 ADAMTS13/vWF-cp 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶 規(guī)格： 48T/96T

 VWF 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規(guī)格： 48T/96T

 BK 大鼠血管舒緩激肽 規(guī)格： 48T/96T

 ANG-R-Tie2 大鼠血管生成素受體Tie2 規(guī)格： 48T/96T

 ANG-R-Tie1 大鼠血管生成素受體Tie1 規(guī)格： 48T/96T

 ANG-4 大鼠血管生成素4 規(guī)格： 48T/96T

 ANG-2 大鼠血管生成素2 規(guī)格： 48T/96T

 ANG-1 大鼠血管生成素1 規(guī)格： 48T/96T

 ANG 大鼠血管生長(zhǎng)素 規(guī)格： 48T/96T

 VCAM-1/CD106 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 VEGFR-2 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2 規(guī)格： 48T/96T

 VEGFR-1 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1 規(guī)格： 48T/96T

 VEGF-D 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D 規(guī)格： 48T/96T

 VEGF-C 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C 規(guī)格： 48T/96T

 VEGF-B 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B 規(guī)格： 48T/96T

毫克

shēng huà shì jì 銅箔 容量： RT，避光 25克

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。