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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

shēng huà shì jì 無水硫酸鈣 容量： 5克

shēng huà shì jì 無水* 容量： 5克

shēng huà shì jì 無水磷酸鈉 容量： 500毫克

shēng huà shì jì 無水* 容量： 5克

shēng huà shì jì 無水* 容量： 保存：-20℃ 5克

shēng huà shì jì 無水二氯化錫 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 無砷鋅粒 容量： 25克

shēng huà shì jì 無菌綿羊血 容量： 100克

shēng huà shì jì 無氨基酵母氮源 容量： 5克

shēng huà shì jì 鎢酸銀 容量： RT 100克

EPI300 感受態(tài)細胞 100ul*50shēng huà shì jì 鎢酸鈉 容量： 保存：-20℃ 50毫克

shēng huà shì jì 鎢酸鉀 容量： 500克

shēng huà shì jì 鎢酸銨 容量： 保存：-20℃ 1克

shēng huà shì jì 鎢酸 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 鎢粉 容量： 10克

shēng huà shì jì 鎢棒 容量： 25克

shēng huà shì jì 烏來糖 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 我妻氏培養(yǎng)基基礎 容量： RT，避光 200毫升

shēng huà shì jì 蝸牛凝集素 容量： 25克

shēng huà shì jì 蝸牛酶 容量： 5克

shēng huà shì jì *抑制劑 容量： RT 25克

shēng huà shì jì *（豬胃粘膜） 容量： 25克

shēng huà shì jì 胃蛋白胨 容量： 100克

 E-Sel

 MHCⅡ/H-1Ⅱ 大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類 規(guī)格： 48T/96T

 MHCⅠ/H-1Ⅰ 大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類 規(guī)格： 48T/96T

 MBP 大鼠主要堿性蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TSGF 大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子 規(guī)格： 48T/96T

 TRAIL-R4 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4 規(guī)格： 48T/96T

 TRAIL-R3 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3 規(guī)格： 48T/96T

 TRAIL-R1 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1 規(guī)格： 48T/96T

 TNFsR-Ⅱ 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 TNFsR-Ⅰ 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

 TNF-β 大鼠腫瘤壞死因子β 規(guī)格： 48T/96T

 TNF-α 大鼠腫瘤壞死因子α 規(guī)格： 48T/96T

 NAP-2/CXCL7 大鼠中性粒細胞趨化蛋白2 規(guī)格： 48T/96T

 NGAL 大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 NE 大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶 規(guī)格： 48T/96T

 ACS 大鼠脂酰*合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 ADP 大鼠脂聯(lián)素 規(guī)格： 48T/96T

 LBP 大鼠脂多糖結合蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 LPL 大鼠脂蛋白脂酶 規(guī)格： 48T/96T

shēng huà shì jì 衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 容量： 2～8℃ 100毫升

注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。