購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

shēng huà shì jì 芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-半* 容量： RT，避光 10克

shēng huà shì jì 戊烷脒*瓊脂基礎(chǔ) 容量： 25克

shēng huà shì jì 戊烷脒 容量： 1米

shēng huà shì jì 戊二酸 容量： 5克

shēng huà shì jì 戊二醛 容量： 500克

shēng huà shì jì 伍德合金 容量： 100克

shēng huà shì jì 五氧化二鉭 容量： 100克

shēng huà shì jì 五氧化二鈮 容量： 100克

shēng huà shì jì 五氧化二磷 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 五氧化二碘 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 五肽胃泌素 容量： 100克

shēng huà shì jì 五硼酸銨 容量： 5克

shēng huà shì jì 五號膽鹽 容量： RT，避光 5克

shēng huà shì jì 無水乙腈 容量： RT，避光 5克

shēng huà shì jì 無水亞硫酸鉀 容量： RT 250克

shēng huà shì jì 無水甜菜堿 容量： 100克

shēng huà shì jì * 容量： 5克

shēng huà shì jì 無水碳酸

 MIP-1α/CCL3 猴子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α 規(guī)格： 48T/96T

 Collagenase I 猴子膠原酶I 規(guī)格： 48T/96T

EPI400 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20 MMP11 猴子基質(zhì)金屬蛋白酶11 規(guī)格： 48T/96T

 FSH 猴子促卵泡素 規(guī)格： 48T/96T

 LTC4 猴子白三烯C4 規(guī)格： 48T/96T

 IL-2R 猴子白介素2受體 規(guī)格： 48T/96T

 IL-1 猴子白介素1 規(guī)格： 48T/96T

 α1-MG 猴子α1微球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TNF-α 猴腫瘤壞死因子α 規(guī)格： 48T/96T

 apo-B100 猴載脂蛋白B100 規(guī)格： 48T/96T

 apo-A1 猴載脂蛋白A1 規(guī)格： 48T/96T

 INS 猴胰島素 規(guī)格： 48T/96T

 sVCAM-1 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sICAM-1 猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 LMA 猴抗肝細(xì)胞膜抗體 規(guī)格： 48T/96T

 hs-CRP 猴超敏C反應(yīng)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-γ 猴γ 干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-α 猴α干擾素 規(guī)格： 48T/96T

鉀 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 無水四硼酸鈉 容量： 1克

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。