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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

β-naphthol 小鼠β萘酚 規(guī)格： 48T/96T

 BLI 小鼠β內酰胺酶抑制劑 規(guī)格： 48T/96T

 β-EPR 小鼠β內啡肽受體 規(guī)格： 48T/96T

 β-EP 小鼠β內啡肽 規(guī)格： 48T/96T

 β-Cat 小鼠β連環(huán)蛋白/聯蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 β Manase 小鼠β甘露糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-β/IFNB 小鼠β干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 Aβ1-42 小鼠β淀粉樣蛋白1-42 規(guī)格： 48T/96T

 Aβ1-40 小鼠β淀粉樣蛋白1-40 規(guī)格： 48T/96T

 βGAL 小鼠β半乳糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 β-hexosaminidase A 小鼠β氨基己糖苷酶A 規(guī)格： 48T/96T

 BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*10β2-GP1 IgA/G/M 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 規(guī)格： 48T/96T

 αHBDH 小鼠α羥基丁酸脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T

 α-glucosidase 小鼠α葡萄糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 α-GST 小鼠α*S轉移酶 規(guī)格： 48T/96T

 α Manase 小鼠α甘露糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-α 小鼠α干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 Gal 小鼠α半乳糖基抗體 規(guī)格： 48T/96T

 αNAG 小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 AFU 小鼠αL巖藻糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 IDUA 小鼠αL艾杜糖苷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 α2-PI 小鼠α2纖溶酶抑制物 規(guī)格： 48T/96T

 α2-AP 小鼠α2抗纖溶酶 規(guī)格： 48T/9

shēng huà shì jì 乙酰胺瓊脂 容量： 1米

shēng huà shì jì 乙酰胺酚紅瓊脂 容量： RT 支

shēng huà shì jì 乙酰胺 容量： 2～8℃ 5克

shēng huà shì jì 乙烯利 容量： 保存：-20℃ 5克

shēng huà shì jì 乙酸正辛酯 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 乙酸正丙酯 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 乙酸銀 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 乙酸鋅 容量： RT，避光 25克

shēng huà shì jì 乙酸纖維素薄膜 容量： 1 O.D.

shēng huà shì jì 乙酸纖維素 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 乙酸* 容量： 2KU

shēng huà shì jì 乙酸* 容量： 15ku

shēng huà shì jì 乙酸銅 容量： RT，避光 10克

shēng huà shì jì 乙酸鈰 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 乙酸鉛 容量： 100毫升

shēng huà shì jì 乙酸鎳 容量： 25克

shēng huà shì jì 乙酸錳 容量： 100克

shēng huà shì jì 乙酸鎂 容量： 2～8℃ 5克

shēng huà shì jì 乙酸鋰 容量： 1克

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注意事項:

1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。