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更新時間:2019-09-24 10:06:24瀏覽次數(shù):204次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*50-生
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*10-生
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
Origami2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | C43(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*10 |
包裝 | 100ul*10 |
分類 | 表達感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
AAV 人腺相關(guān)病毒 規(guī)格: 48T/96T
ADA 人腺苷脫氨酶 規(guī)格: 48T/96T
AC-1 人腺苷酸環(huán)化酶1 規(guī)格: 48T/96T
ABCG2 人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2 規(guī)格: 48T/96T
ABCA1 人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1 規(guī)格: 48T/96T
ADV-Ag 人腺病毒抗原 規(guī)格: 48T/96T
APAF1 人銜接蛋白酶活化因子1 規(guī)格: 48T/96T
ASP 人?;碳さ鞍?規(guī)格: 48T/96T
FSP 人纖維母細胞表面抗原 規(guī)格: 48T/96T
FSP 人纖維母細胞表面抗原 規(guī)格: 48T/96T
FRA 人纖維連接素相關(guān)抗原 規(guī)格: 48T/96T
fgl2 人纖維介素蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TAFI 人纖溶抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
PAI-1 人纖溶酶原激活物抑制因子1 規(guī)格: 48T/96T
PAI 人纖溶酶原激活物抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
PLGA 人纖溶酶原激活劑 規(guī)格: 48T/96T
C43(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*10 Plg 人纖溶酶原 規(guī)格: 48T/96T
PAP 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 規(guī)格: 48T/96T
PL/Fbn 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶 規(guī)格: 48T/96T
FN 人纖連蛋白 規(guī)格: 48T/96T
fibromodulin 人纖調(diào)蛋白 規(guī)格: 48T
shēng huà shì jì 麥芽糖醇 容量: 25克
shēng huà shì jì 麥芽浸膏湯 容量: 100克
shēng huà shì jì 麥芽浸膏 容量: RT 100克
shēng huà shì jì 麥芽浸出粉 容量: 100克
shēng huà shì jì 麥康凱瓊脂平板 容量: 1米
shēng huà shì jì 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 容量: 50克
shēng huà shì jì 麥康凱瓊脂3號 容量: 250克
shēng huà shì jì 麥康凱瓊脂(不含鹽) 容量: 250克
shēng huà shì jì 麥角固醇 容量: 25克
shēng huà shì jì 麥迪、*檢定培養(yǎng)基 容量: RT 支
shēng huà shì jì 麥草畏 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 馬血清 容量: 25克
shēng huà shì jì 馬脾鐵蛋白 容量: 25克
shēng huà shì jì 馬尿酰-組氨酰-* 容量: 100克
shēng huà shì jì 馬尿酸鈉培養(yǎng)基 容量: 100克
shēng huà shì jì 馬尿酸-L-苯* 容量: 保存:-20℃ 25毫克
shēng huà shì jì 馬鈴薯瓊脂 容量: 500毫升
shēng huà shì jì 馬鈴薯葡萄糖肉湯 容量: RT 支
shēng huà shì jì 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 容量: 100克
shēng huà shì jì 馬鈴薯浸出粉 容量: 100克
shēng huà shì jì 馬鈴薯淀粉 容量: 25克
shēng huà shì jì 馬來酰肼鉀鹽 容量: 5克
shēng huà shì jì 馬來酰肼 容量: 2~8℃ 1克
shēng huà shì jì 馬丁肉湯 容量: RT 支
shēng huà shì jì 羅丹寧 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 羅丹明B 容量: 100克
/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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