購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

 Hyp 人羥* 規(guī)格： 48T/96T

 Dyn 人強(qiáng)啡肽 規(guī)格： 48T/96T

 LMP-1 人潛伏膜蛋白1 規(guī)格： 48T/96T

 Pro-ANP 人前心鈉肽 規(guī)格： 48T/96T

 Pro-ANP 人前心鈉肽 規(guī)格： 48T/96T

 PSA 人前列腺特異性抗原 規(guī)格： 48T/96T

 PAP 人前列腺酸性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 PGF 人前列腺素F 規(guī)格： 48T/96T

 PGE2 人前列腺素E2 規(guī)格： 48T/96T

 PGE1 人前列腺素E1 規(guī)格： 48T/96T

 PTGDS 人前列腺素D合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 PGDS 人前列腺素D合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 PGI 人前列環(huán)素 規(guī)格： 48T/96T

 PCP 人前膠原C端肽酶 規(guī)格： 48T/96T

 PA 人前白蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CALLA 人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原 規(guī)格： 48T/96T

 GLUT3 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3 規(guī)格：

shēng huà shì jì 環(huán)己醇 容量： 25克

shēng huà shì jì 環(huán)丁烷-1,1-二羧酸 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 還原型* 容量： 25克

shēng huà shì jì 還原鐵粉 容量： 500克

F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50shēng huà shì jì 還原輔酶Ⅱ四鈉鹽 容量： 100克

shēng huà shì jì 還原輔酶Ⅰ抑制劑 容量： 保存：-20℃ 1克

shēng huà shì jì 還原輔酶Ⅰ二鈉鹽 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 花寶5號(hào) 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 花寶3號(hào) 容量： 500克

shēng huà shì jì 花寶2號(hào) 容量： 100克

shēng huà shì jì 花寶1號(hào) 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒 容量： 100支/包

shēng huà shì jì 虎紅鈉鹽 容量： 100克

shēng huà shì jì 虎紅 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 糊精 容量： RT 5克

48T/96T

注意事項(xiàng):

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。