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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 PARC/CCL18 人肺部活化調節(jié)趨化因子 規(guī)格： 48T/96T

 SP-D 人肺表面活性物質相關蛋白D 規(guī)格： 48T/96T

 SP-C 人肺表面活性物質相關蛋白C 規(guī)格： 48T/96T

 SP-B 人肺表面活性物質相關蛋白B 規(guī)格： 48T/96T

 SP-A 人肺表面活性物質相關蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

人肺癌標志物ELISA Kit，48T/96T 人肺癌標志物ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 DR-70TM 人肺癌標志物DR-70 規(guī)格： 48T/96T

 LTA 人非小細胞肺癌抗原 規(guī)格： 48T/96T

 NNE 人非神經(jīng)元性烯醇化酶 規(guī)格： 48T/96T

 NON 人非甲基化寡核苷酸 規(guī)格： 48T/96T

 AhR 人芳香烴受體 規(guī)格： 48T/96T

AGL1 電擊感受態(tài)細胞 50ul*50 E1/UBAE 人泛素激活酶 規(guī)格： 48T/96T

 Ub 人泛素蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 rT3 人反三碘甲狀腺原氨酸 規(guī)格： 48T/96T

 DNM2 人發(fā)動蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 DPPⅣ 人二肽基肽酶Ⅳ 規(guī)格： 48T/96T

人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉移酶2家族肽B4 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉移酶2家族肽B4 規(guī)格： 48T/96T

 SLC/CCL21 人二級淋巴組織趨化因子 規(guī)格：

shēng huà shì jì β-乳球蛋白 容量： 5克

shēng huà shì jì β-巰基乙醇 容量： 25克

shēng huà shì jì β-葡萄糖醛酸苷酶測試盒 容量： RT 500支/盒

shēng huà shì jì β-葡萄糖苷酸酶 容量： 100克

shēng huà shì jì β-葡萄糖苷酶 容量： 保存：-20℃ 1毫克

shēng huà shì jì β-葡聚糖酶 容量： 500毫克

shēng huà shì jì β-萘乙酸 容量： RT 100克

shēng huà shì jì β-環(huán)糊精 容量： 100克

shēng huà shì jì β-甘油磷酸二鈉五水物 容量： 50毫克

shēng huà shì jì β-甘油磷酸二鈉水合物 容量： 保存：-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì β-* 容量： RT 1克

shēng huà shì jì β-*乙酯鹽酸鹽 容量： RT 10克

shēng huà shì jì β-*甲酯鹽酸鹽 容量： RT 10克

shēng huà shì jì β-半乳糖苷酶 容量： RT 1克

shēng huà shì jì β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶測試盒 容量： RT

48T/96T

 DAO 人二胺氧化酶 規(guī)格： 48T/96T

注意事項:

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。