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更新時間:2019-09-24 12:02:35瀏覽次數(shù):182次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)GV3101(pSoup) 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細胞 50ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | Ar A4 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類 | 根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
LA-E 人類白細胞抗原E 規(guī)格: 48T/96T
+ 規(guī)格: 48T/96T
B7-2/sCD86 牛可溶性白細胞分化抗原86 規(guī)格: 48T/96T
MT 牛金屬硫蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Hpt/HP 牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CG 牛甘膽酸 規(guī)格: 48T/96T
sIgA 牛分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
sIgA 牛分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit,48T/96T 牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
CIAP 牛的牛小腸堿性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
Cholic acid 牛膽酸 規(guī)格: 48T/96T
E2 牛雌二醇 規(guī)格: 48T/96T
Ar A4 感受態(tài)細胞 100ul*50acetone 牛丙酮檢測 規(guī)格: 48T/96T
IL-2R 牛白介素2受體 規(guī)格: 48T/96T
βOHB 牛β羥丁酸 規(guī)格: 48T/96T
α1-AGP 牛α1酸性糖蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CRP 牛C反應(yīng)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
MHC 綿羊主要組織相容性復(fù)合體 規(guī)格: 4
à shì jì L-*甲酯 容量: 100克
shēng huà shì jì L-*二鈉鹽 容量: 1公斤
shēng huà shì jì L-賴氨酸乙酯酸鹽 容量: 100克
shēng huà shì jì L-賴氨酸鹽酸鹽 容量: RT 1克
shēng huà shì jì L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽 容量: RT,避光 25克
shēng huà shì jì L-賴氨酸醋酸 容量: RT 5克
shēng huà shì jì L-賴氨酸 容量: 1公斤
shēng huà shì jì L-酒石酸 容量: 25克
shēng huà shì jì L-*乙酯二鹽 容量: RT,避光 25克
shēng huà shì jì L-*鹽酸鹽 容量: 100克
shēng huà shì jì L-*甲酯酸鹽 容量: 100克
shēng huà shì jì L-*丁酸鋇鹽 容量: 500克
shēng huà shì jì L-*L-*鹽 容量: 1公斤
shēng huà shì jì L-* 容量: 100克
shēng huà shì jì L-焦* 容量: 25克
shēng huà shì jì L-甲狀腺素鈉 容量: RT 5克
shēng huà shì jì L-甲狀腺素 容量: 1公斤
shēng huà shì jì L-肌肽 容量: RT 25克
shēng huà shì jì L-*鹽酸鹽 容量: 1公斤
shēng huà shì jì L-*二甲酯酸鹽 容量: 100克
shēng huà shì jì L-* 容量: RT,避光 25克
8T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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