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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2019-09-25 11:18:05瀏覽次數(shù):225次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | Ar Qual 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*10 |
包裝 | 50ul*10 |
分類 | 發(fā)根農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
shēng huà shì jì 聚乙二醇6000 容量: 500克
shēng huà shì jì 聚乙二醇600 容量: 1克
shēng huà shì jì 聚乙二醇4000 容量: RT 100克
shēng huà shì jì 聚乙二醇400 容量: 保存:-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 聚乙二醇300 容量: 5克
shēng huà shì jì 聚乙二醇20000 容量: 250毫克
shēng huà shì jì 聚乙二醇2000 容量: 25克
shēng huà shì jì 聚乙二醇200 容量: 保存:-20℃ 1克
shēng huà shì jì 聚乙二醇1500 容量: 5克
shēng huà shì jì 聚乙
IgA 大鼠免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
OVA sIgE 大鼠卵清蛋白特異性IgE 規(guī)格: 48T/96T
大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit,48T/96T 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit,
Ar Qual 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*1048T/96T 規(guī)格: 48T/96T
TrxR 大鼠硫氧還蛋白還原酶 規(guī)格: 48T/96T
Trx 大鼠硫氧化還原蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PI Ab-IgG/IgM 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格: 48T/96T
PL-A2 大鼠磷脂酶A2 規(guī)格: 48T/96T
PI3K 大鼠磷酸肌醇3激酶 規(guī)格: 48T/96T
pACCase 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶 規(guī)格: 48T/96T
AMPK 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 規(guī)格: 48T/96T
pERK 大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格: 48T/96T
P-PKC 大鼠磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格: 48T/96T
大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit,48T/96T 大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格:
容量: 1公斤
shēng huà shì jì 聚乙二醇1000 容量: 2~8℃ 1克
shēng huà shì jì 聚酰胺-6-薄膜 容量: 保存-20℃ 1毫克
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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