我公司提供的γ-谷氨酰半*連接酶（GCL）測試盒50管/48樣規(guī)格方法分類：紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務(wù)!咨詢！
產(chǎn)品名稱：γ-谷氨酰半*連接酶（GCL）測試盒50管/48樣規(guī)格
規(guī)格：50管/48樣 測試方法：可見分光光度法

測定意義

GCL 是 GSH 合成的限速酶，GSH 對 GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié)，如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL活性高低對GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。

γ-谷氨酰半*連接酶（GCL）測試盒50管/48樣規(guī)格測定原理

在ATP和Mg2+存在下，GCL催化*和半*合成γ-谷氨酰半*；同時ATP去磷酸化產(chǎn)生無機(jī)磷分子，通過測定無機(jī)磷毫摩爾數(shù)，即可計(jì)算出GCL活性。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備

可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1ml比色皿、雙蒸水。

γ-谷氨酰半*連接酶（GCL）測試盒50管/48樣規(guī)格成及試劑配制
1：預(yù)包被板: 96T/48T
2：酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
γ-谷氨酰半*連接酶（GCL）測試盒50管/48樣規(guī)格注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與Z后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
γ-谷氨酰半*連接酶（GCL）測試盒50管/48樣規(guī)格操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。 7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
20mg    38647-10-8    *乙素    Tripdiolide
20mg    38748-32-2    *甲素    Triptolide
20mg        柯諾辛B    Kenuoxin?B
20mg    76-66-4    柯諾辛    Kenuoxin
20mg    519-02-8    *    Matrine
20mg    491-80-5    雞豆黃素A    Biochanin A
10mg        3'-甲氧基-5'-羥基異黃酮-7-O-    3'- methoxy?-5'- hydroxy?isoflavone -7-O-
20mg    30220-46-3    巨大戟醇    Ingenol
20mg    82517-12-2    5-甲基-7-甲氧基異黃酮    5- methyl?-7- methoxy?isoflavone
20mg    7431-77-8    芥子堿硫氰酸鹽    Sinapine thiocyanate
20mg    673-22-3    4-甲氧基    4- methoxy Salicylaldehyde
20mg    2292-16-2    甲基蓮心堿    Neferine
20mg    5088-90-4    蓮心堿高氯酸鹽    Liensinine perchlorate
20mg    2586-96-1    蓮心堿    Lian Xinjian
20mg    87-89-8    肌醇    Inositol
20mg    357-70-0    加蘭他敏    Galanthamine
20mg    19453    *    Galanthamine hydrobromide
20mg    6902-91-6    吉馬酮    Germacrone

82732-07-8C15H21NO4=279.34級別：BR含量：≥98.0%性狀：粉末。用途：生化研究。保存：RT*鈉/*單鈉鹽/氨基乙酸鈉/Sodium Glycinate    25克    A0242    ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，98%    6000-44-8    RT            100克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    1公斤        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，中文名稱： *鈉 其他中文名稱： *單鈉鹽；氨基乙酸鈉 英文名稱： Sodium Glycinate 其他英文名稱： Glycine monosodium salt；Sodium aminoacetate；Sodium glycocollate；Aminoacetic acid；Aminoethanoic acid；Glycocoll 產(chǎn)品規(guī)格： BR，98% 包裝：25克/100克/500克號：6000-44-8 C2H4NO2Na=97.07級別：BR含量：≥99.0%干燥失重：≤0.5%氯化物：≤0.01% 重金屬：≤0.002%鉛：≤0.0005%汞：≤0.0005%砷：≤0.0003%性狀：淺黃色結(jié)晶粉末。易潮解，易溶于水，水溶液顯堿性用途：生化研究。抑制脊柱索神經(jīng)遞質(zhì)，NMDA受體變構(gòu)調(diào)控因子。工業(yè)上用于洗滌劑、電鍍或有機(jī)合成，食品保鮮等。保存：RTL-脯氨γ-谷氨酰半*連接酶（GCL）測試盒50管/48樣規(guī)格醇/L-(+)-羥甲基吡咯烷/(S)-L-脯氨醇/(S)-(+)-脯氨醇/L-Prolinol    5克    A0245    ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，98%    23356-96-9    RT            25克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    100克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem