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更新時間:2017-07-18 23:37:11瀏覽次數(shù):115次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)我公司提供的NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒100管/96樣圖片方法分類:紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務(wù)!咨詢!
產(chǎn)品名稱:NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒100管/96樣圖片
規(guī)格:100管/96樣 測試方法:微量法
測定意義:
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒100管/96樣圖片測定原理:
NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒100管/96樣圖片注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與Z后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒100管/96樣圖片成及試劑配制
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒100管/96樣圖片操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。 7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。
酸/甲胍基醋酸/Creatine Monohydrate 100克 A0185 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, BR,99% 6020-87-7 RT 1公斤 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 一水肌酸 其他中文名稱: 肌酸;N-甲基胍基乙酸;胍基醋酸;肌肉素;肌氨基酸;甲胍基醋酸 英文名稱: Creatine Monohydrate 其他英文名稱: N-Amidinosarcosine 產(chǎn)品規(guī)格: BR,99% 包裝:100克/500克號:6020-87-7C4H11N3O3?H2O=149.15級別:BR含量:≥99.0%重金屬:≤5ppm硫酸鹽:≤0.03%硫酸灰分:≤1ppm灼燒殘渣:≤0.10%干燥失重:≤11.5%肌酸酐:≤50ppm二氰胺:≤20ppm性狀:晶體或結(jié)晶性粉末,在100℃時失水,303℃分解。微溶于水,不溶于乙醇,水中溶解度:13 G/L 水(20°C),1g/9L醇。熔點:292℃用途:生化研究保存:RT肌酐/肌酸酐/肌氨基酐/2-氨基-1-甲基咪唑啉-4-酮/縮水肌肉素/2-氨基-1,5-二氫-1-甲基-4H-咪唑啉-4-酮/1-甲基乙內(nèi)酰脲-2-酰亞胺/Creatinine 25克 A0186 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, BR,99% 60-27-5 RT 100克 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 1公斤 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem1g 平貝母對照藥材 Fritillaria?control medicine
1g 南五味子對照藥材 Nango Miko?control medicine
1g 牛膝對照藥材 Achyranthes bidentata?control medicine
1g 牛蒡子對照藥材 Fructus Arctii?control medicine
1g 墨旱蓮對照藥材 Eclipta?control medicine
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1g 綿馬貫眾對照藥材 Dryopteris crassirhizoma?control medicine
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NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒100管/96樣圖片1g 麥芽對照藥材 Malt?control medicine
1g 麥冬對照藥材 Ophiopogon japonicus?control medicine
1g 木瓜對照藥材 Papaya?control medicine
1g 鹿銜草對照藥材 Pyrola?control medicine
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