我公司提供的胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格方法分類：紫外分光光度法、可見(jiàn)分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測(cè)服務(wù)!咨詢！
產(chǎn)品名稱：胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格
規(guī)格：50管/48樣 測(cè)試方法：紫外分光光度法

測(cè)定意義

ICDHc（EC 1.1.1.42）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸，同時(shí)還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細(xì)胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來(lái)源，在逆境中該酶活性通常會(huì)發(fā)生顯著變化。

胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格測(cè)定原理

利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng)，在340 nm下測(cè)定NADPH濃度的增加。

所需的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與Z后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn)，可和所購(gòu)經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格成及試劑配制
1：預(yù)包被板: 96T/48T
2：酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。 7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
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比旋光度：-11.5～-13.0°（C=3，H2O，25℃）氯化物：≤0.04%重金屬：≤20ppm干燥失重：≤0.50%灼燒殘?jiān)?le;0.30%性狀：的晶體或結(jié)晶粉末。易溶于水，能溶于乙醇和乙酸乙酯用途：生化研究保存：RTL-甘-酪二肽/甘氨酰-L-*/Glycyl-L-Tryosine    1克    A0183    ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，99%    658-79-7    RT            5克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    25克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，中文名稱： L-甘-酪二肽 其他中文名稱： 甘氨酰-L-* 英文名稱： Glycyl-L-Tryosine 其他英文名稱： Gly-Tyr 產(chǎn)品規(guī)格： BR,99% 包裝：1克/5克/25克號(hào)：658-79-7C11H14N2O4?2H2O =274.24級(jí)別：BR含量：≥99.0%比旋光度：44.5o胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格～46.5o （C=1，H2O）PH：5.5～6.5氯離子：≤200ppm銨鹽：≤200ppm重金屬：≤10ppm鐵鹽：≤10ppm砷鹽：≤1ppm硫酸鹽：≤200ppm灼燒殘?jiān)?le;0.10%性狀：結(jié)晶粉末，溶于水，不溶于醇用途：生化研究保存：RT一水肌酸/肌酸/N-甲基胍基乙酸/胍基醋酸/肌肉素/肌氨基