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更新時(shí)間:2017-07-18 23:23:55瀏覽次數(shù):115次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)我公司提供的輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格方法分類:紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務(wù)!咨詢!
產(chǎn)品名稱:輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格
規(guī)格:50管/48樣 測試方法:高效液相色譜法
測定意義:
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NADP+和NADPH分別是磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)中主要的氫受體和供體。NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。較高的NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值說明細(xì)胞處于較強(qiáng)的磷酸戊糖代謝途徑,生物合成能力旺盛,抗氧能力較強(qiáng)。NADPH/NADP+比值升高也可抑磷酸戊糖途徑的進(jìn)行。
測定原理:
NADP+和NADPH在254 nm下有吸收峰,利用高效液相色譜法在相應(yīng)波長下測定其含量。
需自備的儀器和試劑:
高效液相色譜儀、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、針頭式過濾器(水系,50個(gè),0.22μm)、濾膜(水系和有機(jī)系各2個(gè),0.45μm)、C18柱(4.6 ×150 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個(gè),2mL)、乙腈(120 mL)、甲醇(色譜級,300 mL)、蒸餾水
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與Z后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格成及試劑配制
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。 7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。
20mg 9001-74-5 *酶 Penicillinase
20mg 123748-68-5 七葉皂苷A Seven leaf?saponin A
20mg 81-54-9 羥基茜草素 Purpurin
20mg 33457-62-4 榿木酮 Alder?ketone
20mg 480-39-7 喬松素 Qiao Songsu
20mg 218916-52-0 千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 Thousands of?gold?two?terpene alcohol?two?acetyl?benzoyl?ester
5mg 578-74-5 芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 Apigenin?-7-O- beta?-D-?glucopyranoside
20mg 2680-81-1 去氫二異* Go to the?hydrogen?two?isoeugenol
20mg 67-47-0 5-羥甲基糠醛 5-?hydroxymethyl furfural
20mg 442-51-3 去氫駱駝蓬堿 Harmine
20mg 51-35-4 L-羥* L- hydroxyproline
20mg 88495-63-0 * Artesunate
20mg 20977-05-3 * Seven yezao sodium
20mg 5442/12/6 * Norcantharidin
20mg 7085-55-4 * Troxerutin
20mg 22608-11-3 去甲氧基姜黃素 Demethoxycurcumin
20mg 114-49-8 * Scopolamine hydrobromide
20mg 524-30-1 秦皮苷 Fraxin
99.0%(HPLC)Glupa-carboxylate free acid(enzymatically) :≥87.0%熔點(diǎn):170~180℃摩爾旋光度:+32±2oPH:4.0~6.0性狀:至黃色結(jié)晶粉末用途:生化研究。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的底物保存:2~8℃氧化型*/N-(N-L-γ-谷胺酰基-L-半胱胺?;?*-2,2-二硫化物/L-*(氧化型)/氧化*/GSSG 1克 A0163 日本 BR,99% 27025-41-8 RT 10克 日本 100克 日本中文名稱: 氧化型* 其他中文名稱: N-(N-L-γ-谷胺?;?L-半胱胺酰基)*-2,2-二硫化物;L-*(氧化型);氧化* 英文名稱: GSSG 其他英文名稱: Glutathione oxidized 產(chǎn)品規(guī)格: BR,99% 包裝:1克/10克/100克號:27025-41-8C20H32N6O12S2=612.63含量:≥99.0%比旋光度:-96~-106o 鑒別:合格重金屬:≤20ppm水分:≤8.0%灼燒殘?jiān)?le;0.5%單一雜質(zhì):≤1.0%總雜質(zhì):≤2.0%性狀:微黃色粉末。溶于水,不溶于乙醇。輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格本品1分子能結(jié)合約2分子的溶劑(水、乙醇和丙酮)。在高真空、高溫(大于100℃),能除去結(jié)合的溶劑,同時(shí)部分分解,冷凍不能除去結(jié)合的溶劑。熔點(diǎn)182~185℃。有刺激性用途:生化研究。酶法測定NADP和NADPH的氫受體。保存:RT還原型*/L-還原型*/5-L-谷氨酰-L-半胱氨酰*/GSH 5克 A0164 日本 BR,99% 70-18-8 RT 25
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