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更新時間:2017-07-17 23:22:54瀏覽次數(shù):166次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)我公司提供的NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒100管/96樣規(guī)格方法分類:紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務(wù)!咨詢!
產(chǎn)品名稱:NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒100管/96樣規(guī)格
規(guī)格:100管/96樣 測試方法:微量法
測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。
測定原理:
NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒100管/96樣規(guī)格成及試劑配制
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒100管/96樣規(guī)格注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與Z后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒100管/96樣規(guī)格操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。 7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。
包裝:1克/5克/25克號:1963-21-9C7H14N2O3=174.20級別:BR含量:≥98.0%比旋光度:-19.5±1°PH:5.5~6.5性狀:結(jié)晶粉末用途:生化研究保存:RTL-甘-甘-白三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-*/Gly-Gly-Len 1克 A0130 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, BR,98% 14857-82-0 RT 5克 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 25克 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: L-甘-甘-白三肽 其他中文名稱: 甘氨酰-甘氨酰-L-* 英文名稱: Gly-Gly-Len 其他英文名稱: Glycylglycyl-L-leucine 產(chǎn)品規(guī)格: BR,98% 包裝:1克/5克/25克號:14857-82-0C10H19N3O4=245.28級別:BR含量:≥98.0%比旋光度:-18.5~-19.5°熔點:188~192℃鑒別:呈正反應(yīng)鐵鹽:≤10ppm重金屬:≤10ppm砷鹽:≤1ppm干燥失重:≤0.50%灼燒殘渣:≤0.10%性狀:結(jié)晶粉末用途:生化研究保存:RTL-甘-甘-甘三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-*/二甘氨酰*/三甘氨肽/三*/Gly-Gly-Gly 1克 A0130-1 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, BR,98% 556-33-2 RT 5克 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChemHPLC≥99%,20mg/vial 315-22-0 單響尾蛇毒蛋白 Monocrotalin
HPLC≥98%,20mg/vial 55750-84-0 西紅花苷II Crocin?II
HPLC≥97%,20mg/vial 94238-00-3 梔子黃色素 Gardenia yellow pigment
Standard,20mg/vial 42553-65-1 西紅花苷 Crocin
HPLC≥98%,20mg/vial 91-64-5 Coumarin
HPLC≥98%,20mg/vial 553-21-9 木香烴內(nèi)酯 Costunolide
HPLC≥98%,20mg/vial 13063-54-2 D-四氫藥根堿 D- four?hydrogen?jatrorrhizine
HPLC≥98%,20mg/vial 630-94-4、51014-29-0 去氫鉤藤堿 Corynoxeine
HPLC≥98%,20mg/vial 18797-79-0 紫堇醇靈堿 Corydalis?alcohol?spirit alkali
NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒100管/96樣規(guī)格HPLC≥98%,20mg/vial 4547-24-4 科羅索酸 Corosolic acid
HPLC≥98%,20mg/vial 1198398-71-8 硫酸黃連堿 Huang Lianjian sulfate
HPLC≥98%,20mg/vial 6020-18-4 氯化黃連堿 Huang Lianjian?chloride
HPLC≥98%,20mg/vial 3486-66-6 硫酸黃連堿 Huang Lianjian sulfate
HPLC≥98%,20mg/vial 146501-37-3 沙苑子苷A Complanatoside?A
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