我公司提供的線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測(cè)試盒100管/48樣方法分類：紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測(cè)服務(wù)!咨詢！
產(chǎn)品名稱：線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測(cè)試盒100管/48樣規(guī)格
規(guī)格：100管/48樣 測(cè)試方法：微量法
測(cè)定意義：
線粒體復(fù)合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，由F1和F0兩個(gè)亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產(chǎn)生的質(zhì)子電化學(xué)梯度催化ATP合成，也可逆過(guò)程水解ATP。此外，復(fù)合體Ⅴ還存在于葉綠體、異養(yǎng)菌和光合細(xì)菌中。復(fù)合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關(guān)鍵酶。
測(cè)定原理：
復(fù)合體Ⅴ水解ATP產(chǎn)生ADP和Pi，通過(guò)測(cè)定Pi增加速率來(lái)測(cè)定復(fù)合體Ⅴ活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測(cè)試盒100管/48樣成及試劑配制
1：預(yù)包被板: 96T/48T
2：酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測(cè)試盒100管/48樣注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與Z后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購(gòu)經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測(cè)試盒100管/48樣操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。 7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
 DL-Alanine 其他英文名稱： DL-α-Alanine；DL-2-Amino propanic acid；DL-α-Amino propanic acid；(±)-2-Aminopropionic acid 產(chǎn)品規(guī)格： BR,98.5% 包裝：25克/100克/500克號(hào)：302-72-7C3H7NO2=89.10級(jí)別：BR含量：≥98.5%PH（5%水溶液）：5.5～7.0干燥失重：≤0.20%重金屬：≤0.001%灼燒殘?jiān)?le;0.10%氯化物：≤0.02%硫酸鹽：≤0.02%銨鹽：≤0.02%砷鹽：≤0.0001%鐵鹽：≤0.002%性狀：結(jié)晶粉末。有甜味，味覺值0.06%。200℃升華，264～269℃分解。并隨加熱速度而不同。易溶于熱水，溶于水，微溶于乙醇；由水-乙醇液重結(jié)晶者為斜方晶體系,由水重結(jié)晶者為針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。10%水溶液的PH值5.5-7.0，約于295-300℃熔化并分解，化學(xué)性能穩(wěn)定，遇亞硝酸可轉(zhuǎn)變?yōu)長(zhǎng)-乳酸。易溶于水(16.72g/100ml,25 oC)。微溶于乙醇，無(wú)旋光性用途：生化研究。有機(jī)微量分析測(cè)定氮和氨基氮的標(biāo)準(zhǔn)樣品，肝功能試驗(yàn)中測(cè)定谷一丙轉(zhuǎn)氨酶活力保存：RTβ-*/3-氨基丙酸/β-初油氨基酸/β-絲析氨酸/β-氨基丙酸/β-Alanine    10克    A0004    ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，98%    107-95-9    RT            100克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    1公斤        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，中20mg/支;HPLC≥98%        異嗪皮啶    Isofraxidin
20mg/支        異牡荊素    Isovitexin
HPLC≥98%，200mg/支        L-異*    L- isoleucine
HPLC≥98%，20mg/支        異茴芹內(nèi)酯    Isopimpinellin
HPLC≥98%；20mg/支        異佛手柑內(nèi)酯    Isobergapten
HPLC≥98%；20mg/支        異補(bǔ)骨脂查爾酮    Isopsoralen?chalcone
HPLC≥98%；20mg/支        異補(bǔ)骨脂二氫黃酮    Isopsoralen?two hydrogen?flavones
HPLC≥98%；20mg/支        野黃芩素    Scularin
HPLC≥98%，20mg/支        氧化前胡素    Oxidation of?the former Hu Su
HPLC≥98%；20mg/支        新補(bǔ)骨脂異黃酮    Neobavaisoflavone
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測(cè)試盒100管/48樣200mg/支        L-*    L-?valine
20mg/支        腺苷    Adenosine
20mg/支        *1    Vitamin K1
20mg/支;HPLC≥99%        *    Vitamin E
20mg/支;HPLC≥99%        *3    Vitamin D3