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更新時間:2017-06-08 19:43:35瀏覽次數(shù):173次
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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、 小鼠潘氏細胞雜交瘤細胞株;GCLP技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 小鼠潘氏細胞雜交瘤細胞株;GCLP
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
小鼠潘氏細胞雜交瘤細胞株;GCLP處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。配基:NHS
配基密度:20~40 umol/ml可偶聯(lián)<15mg/ml蛋
平均粒徑Mean particle size:90um
大流速:300cm/h
PH范圍:3~10,在位清洗時PH范圍2~11
偶聯(lián)PH:6~10
〖保存〗狀態(tài):異丙醇
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:液體,底部為乳色膠體
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)
〖保存〗:2~8℃
環(huán)氧瓊脂糖凝膠6B
〖英文名稱〗:Epoxy-activated Sepharose 6B
〖其他名稱〗:Epoxy活化瓊脂糖凝膠6B
〖級別〗:BR
基質(zhì):高度交聯(lián)瓊脂糖凝膠
功能基團:epoxy
配基密度:20-40umoles/ml drained matrix
小鼠潘氏細胞雜交瘤細胞株;GCLP平均粒徑:90um
大流速:300cm/h
偶聯(lián)條件:pH8-10,溫度4-45度,時間1-16小時,可在水相或有機相中偶聯(lián)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:濕潤的色膠體,4-5ml/g
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)
〖保存〗:-20℃
Con A瓊脂糖凝膠4B
〖英文名稱〗:Con A Sepharose 4B
〖其他名稱〗:拌刀豆球蛋瓊脂糖凝膠4B
〖級別〗:BR
特點:基團脫落少,結(jié)合特異性強
基質(zhì):4%交聯(lián)瓊脂糖凝膠
配基:Con A
配基密度:10~18mg/ml
載量:20~50mg甲狀腺球蛋
粒徑:45~165um
大流速:300cm/h
PH范圍:4~9
親和介質(zhì)使用:
1、裝柱:該介質(zhì)凝膠從4℃冰箱中取出后好在室溫下緩慢振搖恢復到室溫,然后再裝柱,以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2、平衡:結(jié)合緩沖液(Binding Buffer)為20mmol/LTris-HCl緩沖液,pH7.4,其中含1mM MnCl2,1mM CaCl2,0.15M NaCl。由于介質(zhì)〖保存〗液含有20%乙醇,因此裝好柱的介質(zhì)必須進行平衡。平衡介質(zhì)所需的液體約為10個柱床體積。由于凝集素和糖基結(jié)合強度弱,為促進糖基結(jié)合,清洗緩沖液中可以不含有
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